Question

【题目】硝基苯酚是工业污水中重要污染物，某同学欲从污水处理厂污泥中分离分解硝基苯酚的细菌。请回答下列有关问题：

（1）为了筛选污泥中可分解硝基苯酚的细菌，在配置培养基时应选择_______(硝基苯酚，硝基苯酚+牛肉膏，硝基苯酚十葡萄糖）作为碳源，不采用其他两组的原因是_________________

（2）纯化菌株时划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。分析造成第二划线区域的第一条线无菌落的可能原因是________________（答一点即可）。

（3）进行梯度稀释时的一般操作是将1mL菌液移入盛有9mL的无菌水中；常用稀释涂布平板法进行活菌计数，其原理是_____________________，但统计的菌落数往往___________（填“多于”或“少于”)稀释液中的活菌数，原因是__________________________。

Answer 1

【答案】硝基苯酚 其他两组分别含有其他碳源，不能保证硝基苯酚是唯一碳源 接种环灼烧后未冷却划线（未从第一区域末端开始） 培养基表面的一个菌落来源于一个活菌 少于 有些活菌在培养过程中死亡（个别菌落可能是由2个或多个细菌形成）

【解析】

微生物生长繁殖所必需的营养物质主要包括碳源、氮源、水和无机盐等，根据题意，欲从污水处理厂污泥中分离分解硝基苯酚的细菌，则需配制以硝基苯酚为唯一碳源的培养基；接种时常用接种环，平板划线法要求灼热的接种环冷却后再划线，否则会灼伤菌株甚至导致死亡。划线时要从上一次划线的末端开始划线，这样接种环上才有菌株。

（1）为了筛选污泥中可分解硝基苯酚的细菌，在配置培养基时应选择以硝基苯酚作为碳源，不采用其他两组，原因是硝基苯酚+牛肉膏的培养基和硝基苯酚十葡萄糖的培养基都含有其他碳源，不能保证硝基苯酚是唯一碳源。

（2）纯化菌株时，通常使用的划线工具是接种环，采用灼烧方法对其进行灭菌，划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落，造成划线无菌落可能的原因是接种环灼烧后未冷却，或划线未从第一区域末端开始划线。

（3）稀释涂布平板法常用来进行微生物的计数，其原理是培养基表面的一个菌落来源于稀释液中的一个活菌，由于菌落可能是由两个或多个细胞形成，以及有些活菌在培养过程中死亡，所以统计的菌落数往往少于稀释液中的活菌数。