题目内容
【题目】某RNA病毒的核酸检测采用逆转录PCR技术，先将待测样本处理后再将样本RNA逆转录成cDNA，然后以cDNA为模板进行扩增。请据此回答下列问题：
（1）样本RNA逆转录成cDNA的原料是________________________。
（2）逆转录PCR反应中使用DNA聚合酶是从水生栖热菌中分离提取，该菌分离提取的DNA聚合酶优势在于________________________。
（3）利用PCR技术扩增目的基因时，所用两种引物的碱基序列不能互补原因是_____________________。
（4）如果利用绵羊个体来生产相关疫苗，则接受目的基因的受体细胞是绵羊的____________。为了从乳汁中获取产物，应在目的基因上游连接上____________等调控组件。
（5）如果用细胞培养来生产相关疫苗，则在传代培养时常用____________分散细胞，该过程中不能用胃蛋白酶代替，原因是____________________________________。
【答案】脱氧核苷酸 耐高温 两种引物若能互补会发生配对，从而会减弱与目的基因的结合 受精卵 乳腺蛋白基因的启动子 胰蛋白质酶 细胞培养的适宜PH为7．2-74，胃蛋白酶作用的适宜PH约为2，当PH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性，所以用胃蛋白酶不行
【解析】
PCR技术：
1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。
2、原理：DNA复制。
3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。
4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。
5、过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。
（1）组成DNA的基本单位是四种游离的脱氧核苷酸，因此RNA逆转录成cDNA的所需的原料是脱氧核苷酸。
（2）PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，PCR技术中用高温使DNA分子热变性，因此从水生栖热菌中分离提取的DNA聚合酶的优势在于耐高温。
（3）PCR技术扩增目的基因时，引物Ⅰ和引物Ⅱ的碱基序列不能互补，防止两种引物发生碱基互补配对，从而会减弱与目的基因的结合。
（4）培育转基因动物时，应该选择受精卵作为受体细胞，因为受精卵的全能性最高。若要从乳汁中获取产物，应将目的基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组。
（5）胰蛋白酶或胶原蛋白酶能使细胞相互分散开来，动物细胞培养的适宜pH为7.2-7.4，而胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性，所以不能用胃蛋白酶分散细胞。
