题目内容
【题目】将餐厨垃圾无害化处理，是环境保护的一项重要措施。某研究团队拟从餐厨垃圾中分离出具有高效降解能力的微生物，并制成菌制剂，用于餐厨垃圾无害化处理。所进行实验的简要步骤如下：
步骤一：取一定量的餐厨垃圾样品，筛除大块杂质后，装入无菌袋中密封，备用。
步骤二：配制用于培养菌种的培养基，配方如下表所示。
成分 | 蛋白氯 | 牛肉膏 | 氯化钠 | 琼脂 |
含量（g/L） | 10 | 15 | 10 | 5 |
步骤三：制备样品稀释液，并将不同浓度的样品稀释液涂布于平板培养基表面进行培养，48h后观察结果。
步骤四：对20种菌种进行分离纯化。
（1）牛肉膏、蛋白胨中含有磷酸盐、糖、维生素和_______等营养成分，写出制备牛肉膏蛋白胨琼脂培养基的简要流程（用“→”连接）： ___________________________________。使用后的培养基一定要进行_______（填“灭菌”或“消毒”）处理。
（2）微生物在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基中可形成菌落，菌落对微生物研究工作有很大作用，可用于_______________________（答出两项即可）等工作。利用稀释涂布平板法进行接种时，要对菌液进行充分稀释的目的是____________________________。
（3）为了比较这些菌种对餐厨垃圾中淀粉的降解效果，配制含淀粉的培养基，分别用于测定各菌种对淀粉的降解效果，并进行测定。下图表示其中4种菌种（X1-X4）在淀粉培养基上的培养结果，写出图示的测定菌种对淀粉降解效果的实验原理：____________________。
【答案】有机氮 计算→称量→溶化→灭菌→倒平板 灭菌 分离菌种 、鉴定菌种、细菌计数、选种育种 使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，能在培养基中形成单个的菌落 菌种对淀粉降解的能力越强，分解培养基中的淀粉就越多，培养基上形成的透明圈就越大，即D/D0比值越大
【解析】
1.微生物实验室分离中配制培养基的操作步骤：计算→称量→溶解→调pH→灭菌→倒平板等步骤。
2.设计实验应遵循的原则有单一变量原则、对照原则、等量原则、科学性原则和可重复性原则。
（1）制备牛肉膏蛋白胨琼脂培养基的简要流程为：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，其中牛肉膏、蛋白胨中含有磷酸盐、糖、维生素和有机氮等营养成分，使用后的培养基一定要进行灭菌处理，以防止对环境造成污染。
（2）微生物在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基中可形成菌落，利用菌落，可完成分离菌种 、鉴定菌种、细菌计数、选种育种等工作。为了获得单个细胞形成的菌落，在利用稀释涂布平板法进行接种时，需要通过充分稀释将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，通过涂布接种后就能在培养基中形成单个的菌落。
（3）实验目的是比较这些菌种对餐厨垃圾中淀粉的降解效果，根据实验目的可知，实验的自变量是菌种的不同，因变量是降解效果的不同，测量指标为透明圈的大小，这里比较的是透明圈的直径与菌落直径的比值，比值越大说明该菌落的菌种分解淀粉的能力越强，测定D/D0值的原理是：菌种对淀粉降解的能力越强，分解培养基中的淀粉就越多，培养基上形成的透明圈就越大，即D/D0比值越大。
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