Question

9．某同学在大肠杆菌培养过程中的操作步骤，其中正确的是（　　）

• A． 培养基中牛肉膏、蛋白胨溶化后，直接补充蒸馏水到100mL
• B． 用1mol/L的NaOH调节pH，使pH为5.0～6.0
• C． 加压到100kPa之前，要彻底排出锅中的冷空气
• D． 将接种环在酒精灯上灼烧，灭菌后立即伸入菌液试管内挑取少量菌种

Answer 1

分析 分离和纯化养大肠杆菌的实验包括制备牛肉膏蛋白胨培养基和纯化大肠杆菌，制备牛肉膏蛋白胨培养基又包括计算、称量、溶化、灭菌、倒平板等操作；纯化大肠杆菌包括接种和培养等步骤，微生物的接种方法主要是平板划线法和稀释涂布平板法，不论那一种方法都要在酒精灯火焰旁进行，以防止杂菌污染．

解答 解：A、制备培养基时，蛋白胨、牛肉膏溶化后，要加入琼脂，加热使琼脂熔化后，补充蒸馏水至100 mL，A错误；
B、大肠杆菌的适宜PH值是偏碱性的，B错误；
C、高压蒸汽灭菌时，在加压至100 kPa之前，要打开排气阀，彻底排出锅内的冷空气，C正确；
D、接种环在酒精灯上灼烧后，要在酒精灯火焰旁冷却接种环，再伸入菌液试管内挑取少量菌液，D错误．
故选：C．

点评 本题的知识点是培养基的配制过程，高压蒸汽灭菌的方法，接种过程中的无菌技术，旨在考查学生对于培养基配制和接种方法的熟练掌握．