题目内容
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的下列操作中需要在火焰旁进行的一组是( )
①土壤取样 ②称取土壤 ③稀释土壤溶液 ④涂布平板 ⑤微生物的培养
A．①②③④⑤ B．②③④⑤ C．③④⑤ D．②③④
D
【解析】应在火焰旁称取土壤 10 g。将称好的土样倒入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，塞好棉塞。在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行。涂布平板在火焰旁，防止杂菌污染，所以D选项正确。
微生物与人类关系密切。虽然有些微生物能使动植物患病，但多数微生物对人类是有益的，请回答下列有关问题：
(1)下表为两种微生物的培养基配方。
| KH2P04 | Na2HP04 | MgS04·7H20 | 葡萄糖 | 尿素 | 琼脂 |
| 1.4g | 2.1g | 0.2g | 10.0g | 1.0g | 15.0g |
| 纤维素粉 | NaN03 | Na2HP04·7H20 | KH2P04 | MgS04·7H20 | KCl | 酵母膏 | 水解酪素 |
| 5g | lg | 1.2g | 0.9g | O.5g | 0.5g | O.5g | 0.5g |
上述两种培养基中的物质溶解后，均用蒸馏水定容到1000 mL。
①如果要进行土壤中分解尿素的细菌的分离，则需要选择上述哪种培养基?___________，该培养基能分离尿素分解菌的原因是______________________________________________。
②在该培养基中可加入_________指示剂，根据指示剂的颜色可鉴定该种细菌能够分解尿素。
③从功能上来看，上述两种培养基均属于_______________________________培养基。
(2)在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板___________放置，这样做的目的是可防止__________________________________________造成污染。
(3)微生物接种的方法很多，在用平板划线法操作结束时，为什么仍需要灼烧接种环?__________________________________________________________________________。
（8分）【生物一生物技术实践】
尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后，才能被植物吸收利用。分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解。
某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：
| KH2PO4 | Na2HPO4 | MgSO4·7H2O | 蛋白胨 | 葡萄糖 | 尿素 | 琼脂 |
| 1.4g | 2.1g | 0.2g | 1.0g | 10.0g | 1.0g | 15.0g |
（2）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用 法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的__________________就能大约推测出样品中活菌数。
（3）初步分离脲酶通常用 法，如下图，试管中收集到的液体最先出现的是___________。鉴定分离出的脲酶纯化程度，一般采用_______法。
（4）该同学设想：由活性脲酶和尿素混合，制成“加酶尿素"，尿素肥效一定更高。为了提高“加酶尿素"中脲酶的利用率，应当采用 技术。
