题目内容
【题目】随着生产要求和科技水平提高，固定化技术应用越来越广泛。图甲表示制备固定化酵母细胞的有关操作；图乙代表固定化细胞中酶活力与载体海藻酸钠浓度的关系（注：酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶活性和酧的数量）。请回答下列问题：
（1）相对固定化酶来说，固定化细胞更多采用的是图甲中的_________________（填“包埋法”“吸附法”或“化学结合法”），原因是_______________________________________________________________。
（2）海藻酸钠常用作固定化细胞的载体。酵母细胞固定化的步骤为：
①酵母细胞的活化：活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态；
②配制0.05mol/L的CaCl2溶液；
③配制海藻酸钠溶液：这一步既要注意海藻酸钠的浓度，如图乙曲线表明浓度为_________________左右的海藻酸钠包埋效果最好，当海藻酸钠浓度较低时，酶活力较低的原因是____________________________。同时也要防止加热时发生焦糊，所以加热时应注意______________________________。
④海藻酸钠溶液与酵母细胞混合；
⑤固定化酵母细胞：以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的X溶液中，X溶液指______溶液。请说出一种检验凝胶珠质量合格的方法___________________________________________。
（3）如果希望反复使用固定化酵母细胞，就需要避免其他微生物的污染。因此在工业生产中，细胞的固定化是在严格的________________条件下进行的。
【答案】包埋法 体积大的细胞难以被吸收或结合 3% 海藻酸钠浓度较低时包埋不紧密，酶分子（细胞）容易漏出，数量不足 小火，或者间断加热，反复几次（或小火间断加热） CaCl2 法一：用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠制作成功。法二：是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠是成功的 无菌
【解析】
酵母细胞的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。在缺水状态下，微生物处于休眠状态．活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态，一般是将干酵母放在蒸馏水中进行活化．活化前应选择足够大的容器，因为酵母细胞活化时体积会增大。影响实验成败的关键步骤是配制海藻酸钠溶液。
（1）相对固定化酶来说，体积大的细胞难以被吸收或结合，因此固定化细胞更多采用的是图甲中的包埋法。
（2）③据图乙曲线表明浓度为3%左右的海藻酸钠包埋效果最好。酶被包埋在海藻酸钠中，当海藻酸钠浓度较低时，包埋不紧密，酶分子（细胞）容易漏出，数量不足，导致酶活力较低。海藻酸钠作为包埋剂，在水中溶解的速度较慢，需要通过加热促进其溶解，温度太高容易发生焦糊，从而使实验失败，所以加热时应注意小火，或者间断加热，反复几次（或小火间断加热）。
⑤固定化酵母细胞：以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的X溶液中，X溶液指CaCl2溶液。检验凝胶珠质量合格的方法：法一：用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠制作成功。法二：是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠是成功的。
（3）如果希望反复使用固定化酵母细胞，就需要避免其他微生物的污染。因此在工业生产中，细胞的固定化是在严格的无菌条件下进行的。
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