题目内容
【题目】人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题：
（1）下列操作必需在严格无菌条件下进行的是_______________。
A.称量培养基的各种成分 B.利用平板划线法接种细菌
C.用酒精擦拭双手 D.溶化培养基的各种成分
（2）按功能分，筛选该菌株时所用的培养基称为_____培养基；该培养基中必须添加的成分有______等。
A.琼脂 B.葡萄糖 C.硝酸铵 D.纤维素
（3）此菌株在培养过程中能被利福平（一种抗生素）抑制，下列微生物中也能被利福平抑制的是_______。
A.硝化细菌 B.手足口病毒 C.自生固氮菌 D.毛霉
（4）刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落。降解圈大小与纤维素酶的_________________有关。
（5）研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4，在不同温度和 pH 条件下进行发酵测得发酵液中酶活性的结果见下图，推测菌株_____更适合用于人工瘤胃发酵，理由是 ______________。
【答案】B 选择培养基 ACD AC 量与活性 J4 发酵过程会产热和产酸，J4 菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高
【解析】
1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本过程为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板五个步骤。
2、无菌技术：消毒和灭菌
消毒 | 灭菌 | |
概念 | 使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包芽孢和孢子) | 使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物(包括芽孢和孢子) |
常用方法 | 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法 | 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 |
适用对象 | 操作空间、某些液体、双手等 | 接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等 |
3、刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
（1）A、配制培养基称量时不需要无菌操作，因为配制完成后需要灭菌处理，A错误；
B、平板划线法接种微生物必须进行无菌操作，B正确；
C、用酒精擦拭双手需的目的是进行消毒，C错误；
D、溶化牛培养基的各种成分时不需要无菌操作，因为配制完成后需要灭菌处理，D错误。
故选B。
（2）根据题意可以知道，筛选该菌株时所用的培养基称为选择培养基；该培养基为固体培养基，其中必须添加琼脂；需要添加硝酸铵作为氮源；添加纤维素作为唯一的碳源，所以ACD选项是正确的。
（3）利福平是一种抗生素，能抑制细菌，因此自生固氮菌和硝化细菌能被抑制，毛霉属于真核生物，故选AC。
（4）在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落，降解圈大小与纤维素酶的量和活性有关。纤维素酶的量越多，活性越强；分解的纤维素越多，透明降解圈越大。
（5）因为胃部PH值较低，根据题意和图示分析可以知道，发酵过程会产热和产酸，J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高，所以推测菌株J4更适合用于人工瘤胃发酵。
【题目】尿素是一种重要的农业肥料，需经细菌的分解才能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问题，请分析回答：
（1）上图是利用________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步________到培养基的表面。
（2）下面是两种培养基配方
表1：A培养基配方
KH2PO4 | Na2HPO4 | MgSO4· 7H2O | 葡萄糖 | 尿素 | 琼脂 | H2O |
1.4 g | 2.1 g | 0.2 g | 10.0 g | 1.0 g | 15.0 g | 1000 mL |
表2：B培养基配方
纤维素粉 | NaNO3 | Na2HPO4· 7H2O | KH2PO4 | MgSO4· 7H2O | KCl | 酵母浸膏 | H2O |
5 g | 1 g | 1.2 g | 0.9 g | 0.5 g | 0.5 g | 0.5 g | 1000 mL |
①配制培养基的操作步骤________(用字母顺序回答)。
a．倒平板 b．计算 c．溶化 d．称量 e．灭菌
②通常培养基采用________灭菌，在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒置，目的是______________________。
③如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择上述__________(A、B)配方的培养基，在该培养基中加入________指示剂，可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。
④据B培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是______________________。
