题目内容
【题目】干旱会影响农作物产量，科学家们对此进行了研究。如图为用探针检验某一抗旱植物基因型的原理，相关基因用R和r表示。
（1）基因R与r的本质区别是___________的不同。在利用PCR技术扩增R或r基因过程中，利用___________可寻找抗旱基因的位置并进行扩增。PCR技术操作步骤中包括两次升温和一次降温，其中降温的目的是___________。
（2）若被检植株发生B现象，不发生A、C现象，则被检植物的基因型为___________。
（3）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，其依据主要是：当植物受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物，吸引农杆菌移向这些细胞，这时农杆菌中的Ti质粒上的___________。
（4）经检测，抗旱基因已经导入烟草细胞，但未检测出抗早基因转录出的mRNA，从构建基因表达载体的角度推测，最可能的原因是___________。
（5）为防止转基因植物将外源基因扩散到其他植物，对生态环境造成潜在危害。科学家设法将目的基因整合到受体细胞的叶绿体基因组中，以避免目的基因通过___________向其他植物扩散。基因组分为基因区和基因间隔区，通常将基因间隔区序列作为插入位点，其目的是___________。
【答案】脱氧核苷酸排列顺序（或碱基对排列顺序） 引物 使引物和模板链结合 Rr T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA 上 基因表达载体上的目的基因首端未加入启动子 花粉 避免了外源基因插入后对叶绿体内源基因表达造成影响
【解析】
基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（4）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：
①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；
②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；
③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。
（1）基因R与r的本质区别是脱氧核苷酸的排列顺序（或碱基对排列顺序）的不同；需要用引物寻找抗旱基因的位置；PCR的操作过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：使引物结合到互补模板链DNA上；③中温延伸：合成子链。
（2）被检植物发生B现象，不发生A、C现象，即R、r探针有形成杂交环，所以被检植物的基因型为Rr。
（3）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，其依据主要是：当植物受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物，吸引农杆菌移向这些细胞，这时农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。
（4）经检测，抗旱基因已经导入到烟草细胞，但未检测出抗旱基因转录出的mRNA，从构建基因表达载体的角度推测，最可能的原因是基因表达载体上目的基因首端未加入启动子。
（5）研究表明，转基因植物可以通过花粉将外源基因扩散到其他植物，从而对生态环境造成潜在的危害，因此，科学家设法将目的基因整合到受体细胞的叶绿体基因组中，以防止目的基因通过花粉向其他植物扩散；将基因间隔区序列作为插入位点就可以避免外源基因对叶绿体内源基因表达造成影响。
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【题目】从H1N1到新型H7N9禽流感病毒的不断出现，威胁着人类健康，接种H7N9流感疫苗是目前预防禽流感的有效措施。请回答下面的问题：
（1）人体接种H7N9疫苗后，其中主要成分血凝素（病毒囊膜糖蛋白）可作为_________刺激机体产生特异性免疫反应。
（2）人体接种疫苗后，一旦H7N9禽流感病毒入侵机体，__________会迅速增殖分化为浆细胞，产生大量抗体，这些抗体与游离的H7N9结合阻止其吸附宿主细胞。
（3）C48/80是一种可激活巨噬细胞（吞噬细胞的一种）的聚合物，研究人员为了研究C48/80对疫苗免疫效应的影响做了如下实验：实验选用128只健康小鼠随机分为八组，采用滴鼻方式给药，28天后用致死剂量H7N9病毒悬液处理小鼠。一段时间后测定小鼠血清中IgG（抗体）水平，在病毒处理后第21天计算各组小鼠成活率，结果如下表：
组别 | 疫苗及辅助剂 | 疫苗剂量（ | 小鼠血清IgG抗体水平 | 小鼠存活率（%） |
A | H7N9+C48/80 | 1. 5 | 13 | 100 |
B | H7N9 | 1. 5 | 11. 3 | 100 |
C | H7N9+C48/80 | 0. 15 | 11. 3 | 87. 5 |
D | H7N9 | 0. 15 | 9. 67 | 50 |
E | H7N9+C48/80 | 0. 015 | 10. 33 | 62. 5 |
F | H7N9 | 0. 015 | 9. 33 | 25 |
G | C48/80 | —— | 6. 0 | 0 |
H | H7N9+CTB+ | 1. 5 | 14. 33 | 100 |
注：CTB+已被证实为一种安全有效的免疫辅助剂，可增强疫苗的免疫力。
①为使实验结果更有说服力，可再增加一组对照实验，其处理方法是___________________________。
②实验数据显示，G组小鼠的血清抗体水平比其他组______________，最可能的原因是______________
③实验结果表明，随H7N9疫苗剂量的增加，免疫小鼠的IgG抗体水平和小鼠存活率的变化分别是_________________________。
