Question

【题目】漆酶是真菌、细菌中的氧化酶，可用于有毒化合物的生物消除。为提高产漆酶菌株（C1）的产酶量，对其培养条件进行优化研究。

Ⅰ.培养基成分的优化研究：为确定最佳的营养成分组合，科研人员配制了9组以A、B为主要营养成分的培养基，并添加0.04%的愈创木酚（被氧化后形成红褐色）。接种C1培养后，结果如下表所示。

实验组	营养成分		培养结果（mm）
	A（20g/L）	B(2.84g/L)	显色圈直径
1	葡萄糖	蛋白胨	37
2	葡萄糖	(NH4)2SO4	49
3	葡萄糖	KNO3	23
4	蔗糖	蛋白胨	25
5	蔗糖	(NH4)2SO4	52
6	？	？	32
7	麦芽糖	蛋白胨	58
8	麦芽糖	(NH4)2SO4	56
9	麦芽糖	KNO3	55

（1）实验组6中的成分A、B分别是________。

（2）据培养结果分析，营养成分的最佳组合是实验组_______，阐述理由_________。

Ⅱ.培养基pH值的优化研究：选取最佳营养成分组合，配制成pH值为3.0、5.0、7.0的三种液体培养基，接种等量C1菌体并培养一段时间，定期取样测定培养基中漆酶量（以酶活力表示），结果如下图所示。

（1）调节培养基的pH值应在_____________（填编号）进行。

①灭菌前②灭菌后倒平板前③倒平板后接种前④接种后

（2）据上图分析，为获得最多的漆酶，C1的最佳培养方案是_________。

Ⅲ.经一系列培养环境的优化，C1产漆酶量有所提高。在此基础上，要获得产酶更高的菌株，可采取的育种方法是__________。

（1）下图表示培养和分离某种细菌的部分操作步骤，下列叙述正确的是（______）。

A．步骤①倒平板操作时，倒好后应将其倒过来放置

B．步骤②接种环火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后划线

C．步骤③三个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落

D．步骤④恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数

（2）借助光学显微镜来观察微生物细胞的结构，发现了一种新的单细胞生物，并欲对其进行分类，下列选项不能作为分类依据的是（_________）。

A．核膜的有无B．核糖体的有无 C．细胞壁的有无D．膜上磷脂的有无

Answer 1

【答案】 蔗糖、KNO3 7 显色圈直径最大，说明被漆酶氧化的愈创木酚最多，酶活力最高 ① 将C1接种于pH5.0培养基中，并于第6天提取 诱导菌株突变再进行筛选 A、C B、D

【解析】试题分析：本题考查微生物的分离和培养以及培养基对微生物的选择利用，通过对对实验现象和结果的分析和处理，再结合题意作答。

Ⅰ.（1）根据表格可知，9组实验组分成三组探究营养成分A对产漆酶菌株的影响，每一组中有探究营养成分B对产漆酶菌株的影响，A的成分包括葡萄糖、蔗糖和麦芽糖，B的成分包括蛋白胨、(NH4)2SO4和KNO3，因此实验组6中的成分A、B分别是蔗糖、KNO3。

（2）据培养结果分析可知，显色圈直径最长的营养成分的最佳组合是实验组7，在实验组中产漆酶菌株显色圈直径最大，说明被漆酶氧化的愈创木酚最多，酶活力最高。

Ⅱ.（1）调节培养基的pH值应在①灭菌前进行，这样不会导致在进行此过程时导致杂菌感染。

（2）据上图分析，为获得最多的漆酶，C1的最佳培养方案是将C1接种于pH5.0培养基中，并于第6天提取，该培养方案的酶活力最大。

Ⅲ. 要获得产酶更高的菌株，可以采用诱变育种方法，即诱导菌株突变再进行筛选。

（1）倒完平板后盖上培养皿，冷却后将平板倒过来放置，A正确；步骤②接种环火焰上灼烧后，待冷却后才可以沾取菌液后平板划线，B错误；步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落，C正确；步骤④培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行分离得到纯种，平板划线法不能对微生物进行计数，D错误。

（2）可以根据核膜的有无，确定该细胞为真核细胞还是原核细胞，A错误；原核细胞和真核细胞均有核糖体，因此不能根据核糖体的有无对该细胞进行分类，B正确；因为动物细胞没有细胞壁，而其他绝大多数生物都具有细胞壁，所以根据细胞壁的有无可以判断该生物是否是动物，C错误；所有的生物膜上均含有磷脂，因此不能根据膜上磷脂的有无对细胞进行分类，D正确。