题目内容
【题目】回答下列（一）、（二）小题：
（一）回答与果酒的制作有关的问题：
（1）洗净的紫葡萄用高锰酸钾溶液浸泡，目的是________。干酵母加入发酵瓶前要活化处理，目的是________。
（2）加入菌种后，若发酵瓶初期出现负压，主要是因为微生物进行______消耗了O2。发酵后期，产生气泡的速率变慢的主要原因是________，导致酵母菌活性减弱。
（3）用不同菌种酿制的果酒风味不同。从野生的葡萄果皮取样，经适当稀释和_______分离等，获得酵母菌单菌落，再经_______后用于酿酒试验。
（4）工厂化生产果酒过程中要对发酵液定期检测，以掌握发酵进程，检测参数包括______和______等。
（二）某病毒是一种单链RNA病毒。通过现代生物技术，可研制该病毒疫苗。回答下列问题：
（1）通过基因工程研制基因重组疫苗。
①若病毒序列已知，可用________法合成目的基因；若病毒序列未知，可先利用病毒核酸样品，在________酶的催化下合成相应的DNA，再建立包括目的基因在内的________，进而从中获取目的基因。
②将目的基因导入大肠杆菌，经筛选、纯化，接种到_______培养基中培养，提取获得疫苗；也可将目的基因导入植物愈伤组织，获得含有目的基因的胚性细胞，经组培获得______，最后再生出完整的可食疫苗植株。
（2）通过细胞工程研制疫苗。
①利用病毒感染Vero-E6细胞株，由Vero-E6细胞来生产疫苗。利用细胞株作为受体细胞是因为同一细胞株的细胞具有相同的_______，从而保证较高的感染率，提高疫苗的单位产量；Vero-E6细胞株可连续传代培养，从中获得的病毒经_______后用于临床试验。
②利用病毒免疫过的动物的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，经筛选、克隆等途径获得单克隆抗体。该单抗作为________用于病毒检测试剂盒。
【答案】去除杂菌 加快酵母繁殖 需氧呼吸 营养物质减少、酒精浓度过高 涂布或划线 扩大培养 酒精浓度 pH 化学合成 逆转录 基因文库 LB液体 胚状体 病毒敏感性 灭活 探针
【解析】
1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧条件下，反应式如下：
；
（2）在无氧条件下，反应式如下：
。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：
当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。
当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
3、目的基因的获取方法：
原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成，工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法；PCR技术扩增目的基因。
4、单克隆抗体的应用：
（1）作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点；
（2）用于治疗疾病和运载药物。
（1）洗净的紫葡萄用高锰酸钾溶液浸泡，目的是去除杂菌；干酵母加入发酵瓶前要活化处理，目的是加快酵母繁殖。
（2）在发酵初期，微生物进行需氧呼吸消耗了O2，所以会出现负压；发酵后期，由于营养物质较少，酒精浓度过高，抑制酵母菌的发酵，酵母菌活性减弱，所以产生气泡的速率变慢。
（3）获得酵母菌单菌落可以采用稀释涂布平板法或平板划线法，从野生的葡萄果皮取样，经适当稀释和涂布或划线；获得单菌落，再经过扩大培养后，用于酿酒实验。
（4）检测酒精发酵可以通过对培养液的酒精浓度和pH进行检测。
（二）（1）①若病毒序列已知，可以用化学合成法合成目的基因；由于该病毒是RNA病毒，所以可以用逆转录酶催化合成DNA，再建立基因文库。
②为了获得尽可能多的疫苗，需要将大肠杆菌进行大量培养，因此经筛选、纯化的大肠杆菌接种到液体LB培养基中培养；或者目的基因导入植物愈伤组织，获得含有目的基因的胚性细胞，经组培获得胚状体，最后再生出完整的可食疫苗植株。
（2）①原代培养细胞传至10代左右就不容易传下去，细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞能存活传到40～50代，这部分细胞称为细胞株，所以同一细胞株具有相同的病毒敏感性；病毒经过灭活后形成疫苗可用于临床试验。
②单克隆抗体可以特异性的和相应的抗原结合，所以单抗可以作为探针用于病毒检测试剂盒。
