Question

【题目】由于多数植物的根系没有固氮能力，所以在农业生产中往往要施用氮肥来提高产量。研究表明土壤中的固氮菌具有固氮能力，为筛选并统计其数量，某兴趣小组利用下列培养基进行了相关研究。

培养基：葡萄糖（10g）、KH2PO4（0．2g）、MgSO4（0．2g）、NaCl（0．2g）、CaSO4（0．2g）、CaCO3（5g）、琼脂（3．5g）蒸馏水（1L）。

回答下列问题：

（1）植物利用氮肥合成含氮有机物，以满足自身生长发育的需要，试列举出存在于叶绿体内的含氮有机物___________（答出三种即可）。

（2）上述培养基从物理性质来区分应属于___________培养基，在此培养基上酵母菌不能生长，其原因是______________________。

（3）若利用该培养基对固氮菌进行计数，应采用的方法是___________。培养一段时间后若继续培养，则固氮菌的数量将___________，其原因是______________________。

（4）获得的菌种要进行临时保存，每几个月都要重新将菌种从旧培养基转移到新鲜的培养基，这样频繁地操作容易使菌种______________________。

Answer 1

【答案】ATP（ADP）、酶、 NADPH（还原性辅酶Ⅰ或NADP+）、叶绿素、磷脂等 固体 缺少酵母菌生长所需的氮源 稀释涂布平板法 下降 固氮菌因缺乏碳源而不能增殖 被污染或产生变异

【解析】

1、培养基按功能分：

种类	制备方法	特征	用途
选择培养基	培养基中加入某种化学成分	根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率	加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
鉴别培养基	加入某种试剂或化学药品	依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计	鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌

2、纯化微生物常用的方法
①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。
②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

（1）蛋白质的组成元素是C、H、O、N等，核酸、磷脂、ATP的组成元素是C、H、O、N、P，植物利用氮肥合成含氮有机物，以满足自身生长发育的需要，试列举出存在于叶绿体内的含氮有机物ATP（ADP）、酶、 NADPH（还原性辅酶Ⅰ或NADP+）、叶绿素、磷脂等。

（2）上述培养基从物理性质来区分，培养基的成分含琼脂（3．5g），应属于固体培养基；在此培养基上酵母菌不能生长，其原因是缺少酵母菌生长所需的氮源。

（3）平板划线法不能用来进行菌落计数，若利用该培养基对固氮菌进行计数，应采用的方法是稀释涂布平板法。培养一段时间后若继续培养，由于培养基中的碳源等物质是有限的，固氮菌因缺乏碳源而不能增殖，导致固氮菌的数量将下降。

（4）获得的菌种要进行临时保存，每几个月都要重新将菌种从旧培养基转移到新鲜的培养基，这样频繁地操作容易使菌种被污染或产生变异。