（多选）在基因工程中，作为基因运输工具的运载体，必须具备的条件有             （    ）

A．能够在宿主细胞中复制，并稳定地保存    

B．具有多个限制酶切点

C．必须是细菌的质粒或噬菌体              

D．具有某些标记基因

请分析回答下列有关基因工程问题：

Ι 基因工程是按人们预先设计的蓝图，将目的基因通过一定方法导入到另一种生物的细胞中，使之产生符合人类需要的新的遗传性状或创造出新的生物类型的现代技术。

57.基因工程常用的三种工具为限制性内切酶、　　　　　　 、质粒，通常选择质粒作为“目的基因的运输载体”是由于　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

58.基因工程一般包括四步：获取目的基因；目的基因与运载体重组；　　　　　　　 ；

　　　　　　　　　 　　。

Ⅱ 在基因工程中通常需要利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR如右图示，包括三个基本反应步骤：①模板DNA的变性：模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后双链解离；②模板DNA与引 物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链结合形成DNA模板--引物结合物；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，合成一条新的与模板DNA 链互补的脱氧核苷酸链。重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得较多的目的基因。

59.温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链结合形成DNA模板--引物结合物时所遵循的原则是　　　　　　　　　　　　　　　　 。

60.在PCR技术中，引物的作用是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

61.从理论上推测，第三轮循环产物中含有引物B的DNA片段所占比例为　　　　　　　　 。

62.下图表示利用PCR技术获取目的基因X的第一次循环产物。则至少需要在　　　 轮循环产物中才能开始出现独立且完整的的X基因。如果经过n次循环，则产物中①所示DNA分子数为　　　　　　 。

63.用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒，得到DNA片段长度如下图（1kb即1000个碱基对），请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点。

（9分）下图表示某细胞膜结构，图中A、B、C、D、E、F表示某些物质，a、b、c、d表示物质跨膜运输方式。请据图回答：

（1）图中物质A是蛋白质；物质B是            ；物质D是          。
（2）单层脂分子铺展在水面上时，亲水端与疏水端排列是不同的，搅拌后形成双层脂分子的球形脂质体。脂质体中裹入DNA就可以作为基因工程的一种工具——运载体，原因是                                                                   。
（3）若图示细胞膜是小肠上皮细胞膜，则从肠道吸收葡萄糖、氨基酸、脂肪酸的方式依次是图中       、     、    （填字母）。细胞膜的功能与其组成密切相关，功能越复杂的细胞膜，            的种类和数量越多。
（4）若提取动物的细胞膜，最好选用              做材料。

（9分）下图表示某细胞膜结构，图中A、B、C、D、E、F表示某些物质，a、b、c、d表示物质跨膜运输方式。请据图回答：

（1）图中物质A是蛋白质；物质B是             ；物质D是           。

（2）单层脂分子铺展在水面上时，亲水端与疏水端排列是不同的，搅拌后形成双层脂分子的球形脂质体。脂质体中裹入DNA就可以作为基因工程的一种工具——运载体，原因是                                                                    。

（3）若图示细胞膜是小肠上皮细胞膜，则从肠道吸收葡萄糖、氨基酸、脂肪酸的方式依次是图中        、      、     （填字母）。细胞膜的功能与其组成密切相关，功能越复杂的细胞膜，             的种类和数量越多。

（4）若提取动物的细胞膜，最好选用               做材料。