摘要:科学家利用基因工程技术成功地将人的胰岛素基因导人大肠杆菌体内.生产出入的胰岛素.在该过程中用质粒作为运载体.已知质粒上含有抗氨苄青霉素和抗四环素的基因.目的基因与质粒的结合位点刚好位于抗氨苄青霉素基因结构内.且受体大肠杆菌体内不含质粒.也不含质粒上的抗药基因.导人完成后.实际上在得到的大肠杆菌中.有的根本没有导入质粒.有的导入的是普通质粒.只有少数导入的是重组质粒. 某科研机构想从培养基上筛选出含重组质粒的大肠杆菌.他们设计了如下实验方案: 第一步:将得到的大肠杆菌接种在含 的培养基上.筛选出含有质粒的大肠杆菌. 第二步:为选出“目的菌种 .将第一步筛选出的大肠杆菌用“影印法 分离. (1)采用涂布平板法.将第一步筛选的大肠杆菌以合适的稀释度涂布到含 质粒的大肠杆菌和含 质粒的太肠杆菌都能生长的培养基上.经培养后形成单菌落.如图B所示. (2)通过一消毒的“印章 .将培养基上的菌落分别按原位印到下图所示的非选择培养基 和选择培养基 上(顺序不能颠倒.C培养基成分与B相同.D上含有氨苄青霉素). (3)培养后对照观察C.D培养基上的单菌落. (4)在C培养基上挑取D培养基上 的位置上的单菌落.从而获得含重组质粒的大肠杆菌.即“目的菌种 . (5)实验结束后.使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉.这样做的目的是 .

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科学家利用基因工程技术成功地将人的胰岛素基因导入大肠杆菌体内,生产出入的胰岛素。在该过程中用质粒作为运载体,已知质粒上含有抗氨苄青霉素(简称氨苄)和抗四环素的基因(位于不同区段),目的基因与质粒的结合位点刚好位于抗氨苄青霉素基因结构内,且受体大肠杆菌体内不含质粒,也不含质粒上的抗药基因。导入完成后,实际上在得到的大肠杆菌中,有的根本没有导入质粒,有的导入的是普通质粒,只有少数导入的是重组质粒。

 某科研机构想从培养基上筛选出含重组质粒的大肠杆菌(即“目的菌种”),他们设计了如下实验方案:

第一步:将得到的大肠杆菌接种在含         的培养基上,筛选出含有质粒的大肠杆菌。

第二步:为选出“目的菌种”,将第一步筛选出的大肠杆菌用“影印法”分离。

(1)采用涂布平板法,将第一步筛选的大肠杆菌以合适的稀释度涂布到含        质粒的大肠杆菌和含    质粒的大肠杆菌都能生长的培养基上,经培养后形成单菌落,如图B所示。

(2)通过一消毒的“印章”(如图A所示),将培养基上的菌落分别按原位印到下图所示的非选择培养基        和选择培养基         上(顺序不能颠倒,C培养基成分与B相同,D上含有氨苄青霉素)。

(3)培养后对照观察C、D培养基上的单菌落。

(4)在C培养基上挑取D培养基上         的位置上的单菌落,从而获得含重组质粒的大肠杆菌,即“目的菌种”。

(5)实验结束后,使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉,这样做的目的是                 

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干扰素是能够抑制多种病毒复制的抗病毒物质。科学家利用基因工程技术从人的T淋巴细胞中提取干扰素基因转入羊的DNA中,培育出羊乳腺生物发生器,使羊乳汁中含有人体干扰素。请回答:

(1)科学家将人的干扰素基因与乳腺蛋白基因的调控组件重组在一起,通过________等方法,导入哺乳动物的________细胞中,然后,将该细胞送入母体内,使其生长发育成为转基因(或成熟)动物。

(2)在基因工程中,________是一种最常用的运载体,它广泛地存在于细菌细胞中,在用目的基因与它形成重组DNA过程中,一般要用到连接DNA分子的工具酶是________,该酶作用于上图________处。(填“a”或“b”);构建目的基因表达的载体中除目的基因外还包括________。

(3)在该工程中切割DNA所用的基因“剪刀”是限制酶,限制酶是一种核酸切割酶,可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种酶BamHI,EcoRI,HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合?________。其正确的末端互补序列为________

(4)如何检测和鉴定人的干扰素基因已被成功导入羊体内?请写出一种方法:

________

(5)科学家陈炬在干扰素生产方面也作出了突出贡献,他成功地把人的干扰素基因嫁接到了烟草的DNA分子上,将重组DNA分子导入植物受体细胞的常用方法有有________法和花粉管通道法。若由导入目的基因的烟草体细胞培养成植株则需要利用________技术。为了确定烟草具有抗病毒能力是否培育成功,既要用放射性同位素标记的DNA作探针进行分子杂交检测,又要用抗病毒的接种实验方法从________水平进行鉴定植株的抗病特性。

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