【题目】转座子是指能从基因组的一个位置移动到另一个位置的 DNA 片段。Ac 片段能编码转座 酶,可自主移动。DS片段需在转座酶作用下,才可以从原来的位置上切离下来,然后随机 插入到所在染色体的其他位置或其他染色体上。

1)用________酶将 DS片段构建在 Ti 质粒的T-DNA 片段上,再用含有该重组质粒的 ________转化水稻,自交筛选获得 DS-T-DNA纯合体(甲)。以同样方法获得Ac-T-DNA 纯合体水稻(乙)。

2)甲、乙杂交获得 Ac/Ds 双因子转座系统水稻,在其后代中筛选到一些淡绿叶突变体。 利用淡绿叶突变体与野生型水稻(甲)进行系列杂交实验,________代获得野生型和 淡绿叶水稻植株分别为 442 株和 130 株,分离比符合31,初步推测淡绿叶突变是单 基因的________性突变。将 442 株野生型植株单株收获和播种,后代发生性状分离的 植株占________,则进一步确认上述推测。

3)为进一步确定突变性状与 Ds 切离转座的相关性,设计 6 种引物(如图 1),对上述 572 株子代的 T-DNA 进行 Ds 转座的 PCR 检测。

①检测原理:Ds 未发生切离的DNA位点,通过引物________可得到400 bp 的扩增产物;Ds 已发生切离的 DNA 位点通过引物________可得到 870 bp的扩增产物。

②扩增产物的电泳结果如图 2,据此判断________类型为淡绿叶突变体。

A 类型:B 类型:C 类型=_______,则突变性状产生与 Ds 片段的切离转座有关。

【题目】γ-氨基丁酸(GABA)是成年动物体中枢神经系统的主要抑制性神经递质。

(1)神经元未受刺激时,细胞膜静息电位为________。通常情况下,当突触前神经元释放的GABA与突触后膜上的________结合后,Cl-通道开放,Cl-顺浓度梯度内流,从而产生抑制性效应。

(2)研究大鼠等哺乳动物(包括人类)胚胎发育早期未成熟神经元时发现,GABA的生理效应与成熟神经元相反。其原因是胞内Cl-浓度显著________于胞外, GABA作为信号引起Cl- ________(填“内流”或“外流”),从而产生兴奋性效应。

(3)在个体发育的不同阶段,神经系统内GABA的通道型受体的特性(既是GABA受体,也是双向Cl-通道)并未改变,GABA的两种作用效应与细胞膜上两种Cl-跨膜共转运体NKCCl和KCC2有关,其作用机制如图1所示。(图中共转运体的大小表示细胞膜上该转运体的相对数量)

据图可知,大鼠成熟神经元中含量相对较低的Cl-共转运体是________

(4)为探究GABA兴奋性效应对神经元发育的影响。将不同基因分别转入三组大鼠胚胎神经组织。待幼鼠出生后第14天,显微镜下观察神经元突起的数量及长度(图2)。

与对照组相比,实验组幼鼠单个神经元________,由此证明GABA的兴奋性效应保证了神经元正常发育。通过检测实验组EGFP的分布及荧光强度以确定KCC2蛋白的________

(5)在患神经性病理痛的成年大鼠神经元中也检测到GABA的兴奋性效应,推测该效应与KCC2和NKCC1表达量有关。研究者以“神经性病理痛”模型大鼠为实验组,用________技术检测KCC2和NKCC1的含量。若结果为________,则证实上述推测。

(6)该系列研究其潜在的应用前景为________

 0  170034  170042  170048  170052  170058  170060  170064  170070  170072  170078  170084  170088  170090  170094  170100  170102  170108  170112  170114  170118  170120  170124  170126  170128  170129  170130  170132  170133  170134  170136  170138  170142  170144  170148  170150  170154  170160  170162  170168  170172  170174  170175 

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