20.在完成了观察洋葱根尖分生区细胞有丝分裂实验后,教师给学生提供了2份资料.
资料一:一份“实验报告”的部分内容.
(一)解离:剪取洋葱根尖“2~3mm”,放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精混合液(体积比为1:1)的玻璃皿中,在室温下解离10~15min.
(二)染色:把根尖放在盛有0.01g/mL龙胆紫溶液的玻璃皿中染色3~5cm.
(三)漂洗:将根尖放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10min.
(四)制片:将根尖放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子把根尖弄碎,盖上载玻片,用拇指轻轻按压载坡片…
资料二:全班20个实验小组的实验数据汇总表(注:各小组计数50个细胞,实验条件与观察计数方法相同)
细胞周期间期分裂期
前期中期后期和末期
实验小组1计数细胞个数43412
实验小组2计数细胞个数44303
全班计数细胞个数880671885
计数细胞总数1 000
各时期细胞数的百分比88.06.71.83.5
(1)请改正“资料一”中的3处错误.将“室温下解离10~15min”改成室温下解离3~5min;实验操作步骤应改为先漂洗后染色;将“盖上载玻片”改成“盖上盖玻片后,再加一片载玻片”
(2)有些因素会影响细胞周期各时期的长短,实验过程中也会产生一些误差.因而对整个实验结果可能产生影响的有①②③④⑤⑥.
①取材时间;②根尖培养温度;③解离时间长短;④漂洗的时间长短;⑤计数的细胞是否属于分生区细胞;⑥细胞周期各时期区分是否准确.
15.回答下列有关基因工程问题.
草甘膦是一种广谱除草剂,其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成,最终导致植物死亡.但是,它的使用有时也会影响到农作物的正常生长.目前,已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因,若将该基因转入农作物植物细胞内,从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦.
(1)如图A-F表示6株植物,其中,植物A和D对草甘膦敏感,B和E对草甘膦天然具有抗性,C和F则经过了转基因处理,但是否成功还未知.若ABC浇清水,DEF浇的水中含有草甘膦,上述植物中,肯定能健康成长的是ABCE.

(2)图的A和B分别表示两段DNA序列.表格分别表示4种限制性核酸内切酶的酶切位点.

据图:假设位于EPSPS基因两侧的DNA序列均如图A所示,则应选择表格中酶2进行酶切;若位于EPSPS基因两侧的DNA序列分别如图A和B所示,则应选择表中酶2和3进行酶切.
(3)假设大肠杆菌突变菌株甲中EPSPS基因的右侧序列如图B所示,请在方框内画出EPSPS基因的右侧经酶切后产生的两个末端的碱基序列.
(4)图甲是目的基因EPSPS(4.0kb,1kb=1000对碱基)与pUC18质粒(2.7kb)重组的示意图.图中Ap′是抗氨苄青霉素基因,lacZ是显色基因,其上的EcoRI识别位点位于目的基因插入位点的右侧,其控制合成某种酶能将无色染料X-gal变成蓝色,最终能在含无色染料X-gal的培养基上将含该基因的菌落染成蓝色.(图乙中深色圆点即为蓝色菌落)

将处理后的目的基因EPSPS与pUC18质粒、DNA连接酶混合后,再与某菌种混合,若要从混合物中筛选出含EPSPS基因的菌株,在图乙的培养基中必须加入氨苄青霉素.请判断图乙中所出现的白色和蓝色两种菌落中,何种颜色菌落会含有重组质粒白色.
(5)现用EcoRI酶切质粒,酶切后进行电泳观察,若出现长度为3.0和3.7kb和1.0和5.7kb的片段,则可以判断该质粒已与目的基因重组成功.(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRI的识别位点之间的碱基对忽略不计).
(6)假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中,但植物F仍没有表现出抗性,分析可能的原因是目的基因没有成功表达或表达的产物失活.
 0  138049  138057  138063  138067  138073  138075  138079  138085  138087  138093  138099  138103  138105  138109  138115  138117  138123  138127  138129  138133  138135  138139  138141  138143  138144  138145  138147  138148  138149  138151  138153  138157  138159  138163  138165  138169  138175  138177  138183  138187  138189  138193  138199  138205  138207  138213  138217  138219  138225  138229  138235  138243  170175 

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