科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组,并成功地在大肠杆菌中得以表达.但在进行基因工程的操作过程中,需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选.已知限制性核酸内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-,限制性核酸内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-,据图回答:

(1)图1过程①所需要的酶是
 

(2)在构建基因表达载体过程中,应用限制性核酸内切酶
 
切割目的基因,用限制性核酸内切酶
 
切割质粒.用限制酶切割目的基因和运载体后形成的黏性末端通过
 
原则进行连接.人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组,原因是
 

(3)在过程③一般将受体大肠杆菌用
 
处理,以增大
 
的通透性,使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞.
(4)将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上得到如图2中a的结果(黑点表示菌落),能够生长的细菌中已导入了
 
,反之则没有导入;再将灭菌绒布按到培养基a上,使绒布表面沾上菌落,然后将绒布按到含四环素的培养基上培养,得到如图2中b的结果(空圈表示与a对照无菌落的位置).与图2中b空圈相对应的图2的a中的菌落表现型是
 
,这些细菌中导入了
 

(5)人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达是因为
 
马里奥?卡佩基等科学家在胚胎干细胞和哺乳动物DNA重组方面的研究中取得一系列突破性发现,这些发现导致了“基因敲除”技术(通常叫基因打靶)的出现,利用这一技术可以准确地“敲除”DNA分子上的特定基因,该技术的过程大致如下:
第一步:分离胚胎干细胞.从小鼠囊胚中分离出胚胎干细胞,在培养基中扩增.这些细胞中需要改造的基因称为“靶基因”.
第二步:突变DNA的体外构建.获取与靶基因同源的DNA片断,利用基因工程技术在该DNA片段上插入neoR基因(新霉素抗性基因),使该片段上的靶基因失活.
第三步:突变DNA与靶基因互换.将体外构建的突变DNA转移入胚胎干细胞,再通过同源互换,用失活靶基因取代两个正常靶基因中的一个,完成对胚胎干细胞的基因改造.
第四步:将第三步处理后的胚胎干细胞,转移到特定培养基中筛选培养.
其基本原理如图所示:
请根据上述资料,回答下列问题.

(1)第一步从小鼠囊胚中分离
 
细胞,再用胰蛋白酶处理后,可得到分散的胚胎干细胞.
(2)第二步中neoR基因插入靶基因使用的工具酶是
 

(3)第四步的特定培养基中必须加入的物质是
 
,该培养基属于
 
培养基.
(4)研究者成功获得如上图所示的“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞,若将该细胞培育成基因敲除小鼠,运用到的生物技术有
 
(写出2种生物技术).
(5)科学家可以通过敲除基因来研究基因的功能,第(4)题中获得的基因敲除小鼠,能否直接用来研究基因的功能?
 
为什么?
 

(6)若利用第(4)题中获得的基因敲除小鼠和非基因敲除小鼠交配,其产生的后代F1中的基因敲除小鼠再和原基因敲除小鼠交配产生F2代,其中纯合的基因敲除小鼠所占比例
 
 0  103465  103473  103479  103483  103489  103491  103495  103501  103503  103509  103515  103519  103521  103525  103531  103533  103539  103543  103545  103549  103551  103555  103557  103559  103560  103561  103563  103564  103565  103567  103569  103573  103575  103579  103581  103585  103591  103593  103599  103603  103605  103609  103615  103621  103623  103629  103633  103635  103641  103645  103651  103659  170175 

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