Question

2．Rag₂基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag₂基因缺失小鼠进行基因治疗．其技术流程如图．下列操作错误的是（　　）

• A． 为了获得更多的卵母细胞，需用促性腺激素对供体进行处理
• B． 步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的细胞核
• C． 步骤②中，重组胚胎培养到原肠胚期时，可从其内细胞团分离出ES细胞
• D． 为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验

Answer 1

分析 1、动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体．
2、胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）．
3、在基因工程中，目的基因和质粒需要用同种限制酶进行切割，形成相同的黏性末端，再用DNA连接酶连接成重组质粒．
4、目的基因分子水平上的检测：
①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术
②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术
③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术
分析题图：图示是利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗的流程，其中①表示获得重组胚胎的过程；②表示早期胚胎培养过程；③表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞．

解答 解：A、为了获得更多的卵母细胞，需用促性腺激素对供体进行处理使其排出更多的卵细胞，A正确；
B、核移植是将体细胞核移植到去核的卵母细胞中，所以实验前要去除卵母细胞的细胞核，B正确；
C、步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其内细胞团分离出ES细胞，C错误；
D、为检测目的基因的表达情况，可采用抗体-抗原杂交技术，若有杂交带出现，表明目的基因已成功表达，D正确．
故选：C．

点评 本题结合利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗的流程图，综合考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记细胞工程的操作步骤及相关细节；识记核移植技术的过程及应用；识记胚胎干细胞的来源及特点，能结合所学的知识准确答题．