Question

3．已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断．人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖．鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖．将这两种细胞在培养皿中混合，加促融剂促进细胞融合，获得杂种细胞，并生产单克隆抗体．请回答：
（1）细胞融合后，试管中细胞的种类是5种．
（2）生产单克隆抗体时，一般不直接利用一个B淋巴细胞，主要原因是B淋巴细胞不能无限增殖．
（3）①过程中，常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等．
（4）②过程为细胞培养，培养液中还需通入气体，其中通入CO₂的目的主要是维持培养液的pH．
（5）④表示杂交瘤细胞的扩大培养，其既可在体外培养，也可注射到小鼠腹腔内培养．体内培养与体外培养相比，其优点是无需再提供营养物质以及无菌环境，操作简便．
（6）为了从培养液中分离出杂种细胞，需在③过程向培养液中加入氨基嘌呤，理由是杂交瘤细胞可利用淋巴细胞中的S途径合成DNA，从而才能在该培养液中增殖．

Answer 1

分析 1、分析题图：①是诱导细胞融合，②利用特定选择培养基培养并筛选，获得杂交瘤细胞，③用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞，④是培养筛选出的杂交瘤细胞
2、单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），不需要A、B、AA、BB型细胞．第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞．

解答 解：（1）细胞融合后，试管中细胞的种类是5种，A、B、AA、BB、AB型细胞．
（2）B淋巴细胞不能无限增殖，故生产单克隆抗体时，一般不直接利用一个B淋巴细胞．
（3）①诱导细胞融合，常用的诱导方法有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等．
（4）②过程为细胞培养，培养液中还需通入气体，其中通入CO₂的目的主要是维持培养液的pH．
（5）④表示杂交瘤细胞的扩大培养，其既可在体外培养，也可注射到小鼠腹腔内培养．体内培养与体外培养相比，其优点是无需再提供营养物质以及无菌环境，操作简便．
（6）在培养液中加入氨基嘌呤，培养后收集增殖细胞．加入氨基嘌呤后，使D合成途径阻断，仅有D全合成途径的骨髓细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，淋巴细胞一般不分裂增殖．因此培养液中加入该物质后，不能生长的细胞有骨髓瘤细胞、融合的淋巴细胞、融合的骨髓瘤细胞、淋巴细胞．人淋巴细胞和骨髓癌细胞融合后的杂种细胞中可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖．
故答案为：
（1）5
（2）B淋巴细胞不能无限增殖
（3）聚乙二醇、灭活的病毒、电激
（4）细胞   维持培养液的pH
（5）腹腔  无需再提供营养物质以及无菌环境，操作简便
（6）氨基嘌呤    淋巴细胞中的S

点评 题考查单克隆抗体的制备过程，意在考查考生分析题文中提取有效信息和得出正确结论的能力；识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识，解决生物学问题的能力