题目内容
苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，①为土壤样品。请回答下列问题。
(1)②中培养目的菌株的选择培养基中应加入________作为碳源，②中不同浓度碳源的培养基________(A.影响；B.不影响)细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用________法。
(2)④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于________；使用________法可以在⑥上获得单菌落。
采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养？ ______________________。
(3)如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小？__________________________。
(4)实验过程中如何防止其他微生物的污染？__________________________。
(1)苯酚 A 稀释平板计数(或活菌计数或菌落计数)
(2)④含除苯酚外的其他碳源，⑤以苯酚为唯一碳源 平板分离(或稀释涂布平板或平板划线分离) 避免培养过程产生的水分影响微生物的生长
(3)用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株，一定时间后，通过测定接种了不同菌株的培养液中的pH来测定培养液中苯酚含量
(4)培养基灭菌，接种环境灭菌，接种过程无菌操作
解析
科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。如图是转基因抗盐烟草的培育过程，含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下面的问题。
(1)①过程获得的抗盐基因可用PCR技术进行扩增，该技术须用________酶，所需的原料是________。
(2)已知几种限制酶识别序列及其切割位点(如下表)：
| 限制酶 | BamHⅠ | Hind Ⅲ | EcoR Ⅰ | Sma Ⅰ |
| 识别序列及 切割位点 |  |  |  |  |
__________________________________________________________________
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图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，应选用________酶对外源DNA、质粒进行切割。
(3)图中⑤、⑥依次表示组织培养过程中抗盐烟草细胞的________、________过程。
(4)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的________作探针进行分子杂交检测，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是___________________________________________________。
