Question

5．复性温度是影响PCR特异性的较重要因素．变性后温度快速冷却至40～60℃，可使引物和模板发生结合．PCR的结果可不考虑原来解旋开的两个DNA模板链的重新结合，原因是（　　）

• A． 引物是人工合成的
• B． 引物为DNA聚合酶提供了3′端
• C． 加入引物的量足够多而模板链数量少
• D． 模板链加热解旋已经变性不可能再次结合

Answer 1

分析 PCR技术：
1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术．
2、原理：DNA复制．
3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物．
4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）
5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．

解答 解：A、引物是人工合成的与PCR的结果可不考虑原来解旋开的两个DNA模板链的重新结合无关，A错误；
B、引物为DNA聚合酶提供了3′端与PCR的结果可不考虑原来解旋开的两个DNA模板链的重新结合没关系，B错误；
C、由于加入引物的量足够多而模板链数量少，因此PCR的结果可不考虑原来解旋开的两个DNA模板链的重新结合，C正确；
D、模板链加热解旋变性后，在降低温度的情况下还能再次结合，D错误．
故选：C．

点评 本题考查PCR技术的相关知识，要求考生识记PCR技术的原理、概念、条件及过程，能结合所学的知识准确判断各选项．