Question

19．幽门螺杆菌（Hp）感染是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因素．在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养．实验基本步骤如下：
配制培养基→灭菌、倒平板→X→培养→观察
请回答：
（1）在微生物学中，选择培养基是指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基．（2）在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有脲酶，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现红色环带．
（3）步骤X表示接种．在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液涂布到培养基平面上．菌液稀释的目的是为了获得单一菌落．
（4）临床上用¹⁴C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将¹⁴C标记的尿素分解为NH₃和¹⁴CO₂．
（5）测定菌数时，在对应稀释倍数为10⁶的培养基中，得到以下几种结果，其中正确可信的是D
A．一个平板，统计的菌落数是23
B．两个平板，统计的菌落数分别是22和26，取平均值24
C．三个平板，统计的菌落数分别是21、5和52，取平均值26
D．四个平板，统计的菌落数分别是21、30、24和25，取平均值25
（6）一同学在对应稀释倍数为10⁶的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌株数是1.17×10⁸．（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL）

Answer 1

分析 1、接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞．微生物的营养物质有5类，分别是水、无机盐、碳源、氮源及生长因子．
2、由于细菌分解在尿素的过程中合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，PH升高，所以可以用检测pH的变化的方法来判断尿素是否被分解，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后产生氨，PH升高，指示剂变红．
3、检测土壤中细菌总数，可以看出采用的计数方法是稀释涂布平板法进行计数．用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，选择菌落数在30～300的进行记数，求起平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数．

解答 解：（1）培养基类型中，选择培养基是指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基．
（2）由于细菌分解在尿素的过程中合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，PH升高，所以可以用检测pH的变化的方法来判断尿素是否被分解，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后产生氨，PH升高，指示剂变红．
（3）在实验操作过程中要先灭菌、倒平板，再进行接种．接种时先将菌液稀释，以获得单一菌落，再涂布到培养基平面上．
（4）临床上用¹⁴C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将¹⁴C标记的尿素分解为NH₃和¹⁴CO₂．
（5）A、平板数太少，所得数据具有一定的偶然性，故不可信，A错误；
B、用稀释涂布平板法测定样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，B错误；
C、三个平板的菌落数差距太大，数据不可信，C错误；
D、采用四个平板，并且数据比较接近，因此求平均值所得数据可信，D正确．
（6）由于菌落数的平均值为23.4，稀释倍数是10⁶，所取稀释液的体积为0.2mL，故每毫升样品中的菌落数是23.4÷0.2×10⁶=1.17×10⁸．
故答案为：
（1）抑制或阻止   
（2）酚红  脲酶  氮  红 
（3）接种　涂布　单一 
（4）尿素 
（5）D   
（6）1.17×10⁸

点评 本题考查了微生物的分离与培养的有关知识，要求考生识记培养基的类型以及功能，掌握尿素分解菌选择培养和鉴定的方法和原理，掌握微生物分离与计数的方法等，再结合所学知识准确答题．