Question

12．莠去津是一种含氮农药（化学名称：2-氯-4-二乙胺基-6-异丙胺基-1，3，5-三嗪），在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，可按下面程序选育能降解莠去津的细菌（目的菌）．请据图回答：（已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明）

（1）由图推断，从A瓶到C瓶液体培养的过程称为选择培养，目的是初步选择能降解莠去津的细菌（目的菌）并增加其数量．
（2）在将C瓶菌种接种到固体培养基之前通常要进行梯度稀释，从图中看本实验将菌种接种到固体培养基的方法是稀释涂布平板法．
（3）一段时间后，培养基出现无透明圈和有透明圈两种菌落，我们筛选的目的菌是有透明圈菌落中的细菌，该菌落生长所需的氮元素主要来源于莠去津．
（4）为弄清固体培养基中的非目的菌的菌落来自C瓶菌种还是培养基，应如何设置对照组？配制的培养基灭菌后不接种菌种，与实验组放在相同条件下培养．
（5）某同学计划统计C瓶中“目的菌”的总数，他选用10^-4稀释液进行涂布分离，且设置了3个培养皿的实验组．该同学得到的3个平板的菌落数分别是21、212和256，该同学以这3个平板上菌落平均数作为统计结果．你认为合理吗？不合理．如何解释3个平板上的数据差异？可能在操作过程中出现了错误如某一组实验取菌液太少或涂布不均匀或涂布器未冷却充分杀死了细菌（其他合理答案可给分）．
（6）实验结束后，除了菌种保存外，使用过的培养基及培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散．

Answer 1

分析 1、从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株，其中选择培养的目的是初步选择能目的菌，并提高其密度．
2、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）据图分析，从A瓶到C瓶液体培养的过程称为选择培养，目的是初步选择能降解莠去津的细菌（目的菌），并提高其密度．
（2）在将C瓶菌种接种到固体培养基之前通常要进行梯度稀释，据图分析，本实验采用的接种方法是稀释涂布平板法．
（3）目的菌可以降解培养基中的莠去津作为唯一氮源，并形成有透明带的菌落．
（4）本实验的对照组应该为配置的培养基灭菌后不接种，与实验组放在相同条件下培养．
（5）该同学得到的3个平板的菌落数分别是21、212和256，其中有一个平板的数据与其他两个相差较大，因此该同学以这3个平板上菌落平均数作为统计结果不合理．这3个平板上的数据差异产生的原因可能是：在操作过程中出现了错误如某一组实验取菌液太少或涂布不均匀或涂布器未冷却充分杀死了细菌．
（6）实验结束后，除了菌种保存外，使用过的培养基及培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散．
故答案为：
（1）选择培养　初步选择能降解莠去津的细菌（目的菌）并增加其数量
（2）梯度稀释　稀释涂布平板
（3）有透明圈　莠去津
（4）配制的培养基灭菌后不接种菌种，与实验组放在相同条件下培养
（5）不合理   可能在操作过程中出现了错误如某一组实验取菌液太少或涂布不均匀或涂布器未冷却充分杀死了细菌（其他合理答案可给分）
（6）灭菌

点评 本题主要考查微生物的筛选分离过程，意在强化学生对微生物的分离过程的认识和实验操作过程的要求．