Question

动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础，在动物细胞工程的其他技术中都得广泛应用（如下图）。下面是与动物细胞工程相关的问题，请分析回答：

（1）在进行动物细胞培养时，首先要将动物组织剪碎，然后用　　　　处理，以分散成单个细胞，制成细胞悬液。

（2）动物细胞培养时，要保证细胞必需的营养、适宜的温度　和pH条件，还要提供无菌、无毒和适宜的气体环境。为达到无菌、无毒的环境条件，除了要对培养液和培养器具进行消毒外，还要①　　　　　，②　　　　　。气体环境中CO₂的作用是　　　　。

（3）应用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，原因是　　　　　　　。

（4）下图表示单隆抗体的制备过程，请分析回答：

①给小鼠注射特定抗原后产生的、与骨髓瘤细胞融合的细胞是　　　　。

②在细胞融合的过程中，常用的化学诱导剂是　　　　；培养液中的细胞类型有　　　。（小鼠产生的细胞和骨髓瘤细胞分别用A、B表示）

③筛选出的杂交瘤细胞所表现出的优良性状是　　　　　　　　　　　　　　。

 

Answer 1

【答案】

（9分）（1） 胰蛋白酶（胶原蛋白酶）　

（2）①在培养液中加入一定量的抗生素　②定期更换培养液　、

　　　　　　　维持培养液的PH　

（3）10代以后的细胞遗传物质可能发生改变（或保证供体细胞正常的遗传基础）　

（4）①B淋巴细胞（浆细胞）　②聚乙二醇（PEG）、AA，BB，AB，A，B　　

　 　③可在体外条件下，无限增殖，又能分泌单一抗体

【解析】动物细胞分散开来通常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理；如果培养液有杂菌的污染，那么杂菌会于培养液中的细胞形成竞争关系，所以要经过处理：灭菌或者添加一定量的抗生素；定期更换培养液，以便清除代谢产物，加入CO2维持PH值的相对稳定，当分裂的细胞生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂，这种现象叫做接触抑制。10代以后的细胞遗传物质可能发生改变（或保证供体细胞正常的遗传基础），可以作为核移植的供体细胞，单克隆抗体通常用浆细胞或经免疫的B细胞与骨髓瘤细胞融合，化学促融剂通常采用聚乙二醇处理，培养液中融合的细胞有自身细胞融合，也有杂交瘤细胞，还有没有融合的细胞，杂交瘤细胞一方面能产生单一抗体，另一方面也能无限增殖。