Question

12．对于不同的生物，将重组基因导入受体细胞的方法有差异，下列方法不合适的是（　　）

• A． 以质粒为载体，利用大肠杆菌生产人的胰岛素时，可用氯化钙处理大肠杆菌
• B． 以噬菌体为载体，利用大肠杆菌生产人的凝血因子时，可使其直接侵染大肠杆菌
• C． 以质粒为载体，利用转基因羊生产人的乳铁蛋白时，可用显微注射技术将重组基因导入受精卵
• D． 以质粒为载体，培育转基因植物时，可借鉴质粒侵染细胞的途径，用重组质粒侵染植物细胞

Answer 1

分析 1、基因工程的工具：
（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．
（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．
2、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：A、以质粒为载体，利用大肠杆菌生产人的胰岛素时，可用氯化钙处理大肠杆菌，使之成为感受态，A正确；
B、以噬菌体为载体，利用大肠杆菌生产人的凝血因子时，可使其直接侵染大肠杆菌，DNA分子进入细菌体内，B正确；
C、以质粒为载体，利用转基因羊生产人的乳铁蛋白时，可用显微注射技术将重组基因导入羊的受精卵，并进行早期胚胎培养和胚胎移植，C正确；
D、以质粒为载体，培育转基因植物时，常用农杆菌转化法，D错误．
故选：D．

点评 本题考查基因工程的工具和步骤，意在考查学生的识记和理解能力，解题的关键是掌握相关知识．