Question

【题目】在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答：

请据图回答：

（1）A过程需要的酶有________________________。

（2）B过程及其结果体现质粒作为运载体必须具备的两个条件是________________________________。

（3）C过程的培养基条含有必要物质、琼脂和激素外，还必须加入____________。

（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用____________作为探针。

Answer 1

【答案】 限制性内切酶和DNA连接酶 具有标记基因能在宿主细胞中复制并稳定保存 卡那霉素 放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因

【解析】试题分析：根据题意和图示分析可知，图中A表示基因表达载体的构建过程；B表示用选择培养基筛选含有重组质粒的土壤农杆菌的过程；C表示脱分化过程；D表示转基因抗虫植株的检测。

（1）图中A为基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，还需DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒。

（2）B过程是培养并选择含有重组质粒的土壤农杆菌，其中“选择”体现了质粒作为运载体必须具备具有标记基因；“培养”体现了质粒作为运载体必须能在宿主细胞中复制并稳定保存。

（3）C过程表示脱分化过程，主要是进行诱导选择，既要诱导出愈伤组织还要进行筛选，筛选出被含重组质粒的农杆菌侵染的叶片细胞，淘汰掉普通细胞，根据其标记基因是卡那霉素抗性基因判断应添加卡那霉素。

（4）如果要检测转基因是否成功，D过程最好采用放射性同位素标记的抗虫基因作为探针，利用DNA分子杂交原理进行检测。