Question

【题目】已知细菌X可以产生脂肪酶，用于生物柴油的生产。请回答下列问题：

（1）为获取细菌X，可从含有油料种子腐烂物的土壤中取样，用_________（“液体”或“固体”）培养基进行选择培养，选择培养的目的是___________________，以确保能够从样品中分离所需微生物。

（2）若要统计土壤样品中细菌X的数目，宜采用________________法进行接种，该接种方法的计数结果往往会比显微镜直接计数结果小，原因是__________。

（3）如果将1ml菌液稀释100倍，在4个平板上分别加入0.1ml的上述稀释液，经过培养后，4个平板上的菌落数分别为29、32、35、38，据此可得出每升菌液中的活菌数为_______。

（4）纯化获得的菌种若采取临时保藏的方法保存菌种，不能保存很长时间，原因是___。

Answer 1

【答案】液体 增大细菌X的浓度 稀释涂布平板 该方法只是统计活菌数，而且多个菌体相互靠近时会形成一个菌落，造成计数结果偏小 3.5×107 菌种易被污染或产生变异

【解析】

细菌X的分离原理： 细菌X可以产生脂肪酶，能分解脂肪加以利用，故在用脂肪作为唯一碳源的培养基中，细菌X能够很好地生长，其他微生物则不能生长。在液体选择培养的条件下，可以使微生物充分接触营养物质，使适应环境的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需的微生物的作用。接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可用于对微生物进行计数。每克样品中的菌株数（或“每ml样液中的菌株数”）＝(C÷V)×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。临时保藏法保存菌种时，菌种容易被污染或产生变异，因此这种方法保存的时间不长。

（1）为获取细菌X，可从含有油料种子腐烂物的土壤中取样，用液体培养基进行选择培养。选择培养的目的是增大细菌X的浓度的浓度，以确保能够从样品中分离到所需的微生物。

（2）若要对筛选获得的菌液进行计数，应将菌液用稀释涂布平板法接种到平板上。该方法只是统计活菌数，而且多个菌体相互靠近时会形成一个菌落，造成计数结果偏小。

（3）如果将1mL菌液稀释100倍，在3个平板上分别加入0.1mL的稀释液，经过培养后，4个平板的菌落分别是29、32、35、38，据此可得出每升菌液中的活菌数为 （29+32+35+38）/4×10×1000×100=3.5×107。
（4）采用临时保藏法保存菌种时，菌种容易被污染或产生变异，因此这种方法保存的时间不长。