Question

7．毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KlFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关．获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图．

（1）过程①构建的重组表达载体除具有KlFⅡ基因外，还必须有启动子、终止子以及标记基因等．其中标记基因的作用是鉴别受体细胞中否含有目的基因．
（2）在过程②中，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理能将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞．在培养过程中，需将成纤维细胞置于pH值约为7.2-7.4培养液中，并且放在含95%的空气加5%CO₂的混合气体的培养箱中进行培养．
（3）在过程③中，卵母细胞除可从活体输卵管中采集外．还可以从已宰杀的母羊卵巢中获取；成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行去核处理，同时用微型吸管吸走第一极体．

Answer 1

分析 分析题图：图示表示获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程图，其中①表示基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶和DNA连接酶；②表示动物细胞培养过程，该过程需要采用胰蛋白酶处理组织块以获得单个细胞；③表示卵母细胞的采集和培养过程．

解答 解：（1）基因表达载体包括目的基因、标记基因、启动子、终止子等，其中标记基因的作用是鉴别受体细胞中否含有目的基因．
（2）胰蛋白酶可将组织块分散成单个细胞；在培养过程中，需将成纤维细胞置于pH值约为7.2-7.4培养液中；动物细胞培养过程中需要一定的气体环境（95%氧气和5%二氧化碳），其中5%CO₂的作用是维持培养基（液）的pH．
（3）③表示卵母细胞的采集，卵母细胞除可从活体输卵管中采集外，还可以从已宰杀的母羊卵巢中获取，但后者需要在体外培养成熟后才能参与受精；成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行去核处理，同时用微型吸管吸走第一极体．
故答案为：
（1）启动子   终止子  标记基因   鉴别受体细胞中否含有目的基因
（2）胰蛋白酶或胶原蛋白酶   7.2-7.4  5%CO₂
（3）输卵管   卵巢   第一极体

点评 本题结合转基因山羊培育过程图，考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记所列知识要点，能准确判断图中各过程的名称，并能在较简单的情境中使用，属于考纲识记层次的考查．