Question

【题目】已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：

（1）微生物A产生的油脂不易挥发，可选用________（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。

（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以________为碳源的固体培养基进行培养。

（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用________________直接计数；若要测定其活菌数量，可选用________________法进行计数。

（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，________ ℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕________℃设计后续实验。

Answer 1

【答案】萃取法 油脂 血细胞计数法 稀释涂布平板 45 40

【解析】

微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

植物有效成分的提取可用蒸馏法、压榨法或萃取法，因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取。

（1）因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，应用萃取法提取。

（2）筛选产脂肪酶的微生物B时，应该使用只有目的菌能够生存的，其他微生物不能生存的选择培养基，培养基中应该添加油脂作为唯一碳源。

（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数；若要测定培养液中微生物B的活菌数量，可选用稀释涂布平板法进行计数。

（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，45℃条件下该酶活力最小，该酶的最适温度为40℃左右，为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕40℃设计后续实验。