题目内容
【题目】人组织纤溶酶原激活物（htPA)是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：
（1）htPA基因与载体用__________切割后，通过DIVA连接酶连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用____________技术。
（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其____________。采集的精子需要经过____________，才具备受精能力。
（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是_____________。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行___________。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的______________。
（4）若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到_________，说明目的基因成功表达。
【答案】 同种限制性核酸内切酶(或同种限制酶) DNA分子杂交 超数排卵 获能(处理) 显微注射法 性别鉴定 全能性 htPA(或人组织纤溶酶原激活物)
【解析】试题分析：本题结合转htPA基因母羊的培育过程图，考查基因工程的相关知识，解题关键能识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能结合所学的知识准确答题。
（1）目的基因和运载体需用同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶）切割，产生相同的粘性末端，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用DNA分子杂交（或核酸探针）技术，原理是碱基互补配对。
（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其超数排卵。采集的精子需要经过获能（处理），才具备受精能力。
（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是显微注射法。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定，以选择母羊的胚胎进行移植．利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的全能性。
（4）若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到htPA（或人组织纤溶酶原激活物），说明目的基因成功表达。
