Question

18．急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过消化道进入人体导致的．因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施，请回答下列与检验饮用水有关的问题：
（1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为稀释涂布平板法．在下面所示的四种菌落分布图中，不可能是用该方法得到的是D．
（2）用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？需要．为什么？因为需要判断培养基是否被杂菌污染（培养基灭菌是否合格）．
（3）微生物的鉴定：为检测尿素分解菌的存在与否，在以尿素为唯一氮源的选择  （选择、鉴别）培养基中加入酚红指示剂，如果存在尿素分解菌，则指示剂将变红色．
（4）对培养基进行灭菌常常使用高压蒸汽灭菌法．
（5）如分别取0.1mL已稀释10³倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为5.6×10⁸，该数值往往比细菌的实际数目要低．
（6）微生物的应用：在葡萄酒的自然发酵过程中，运用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌发酵产生酒精，请写出该过程的化学反应式：C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2C₂H₅OH+2CO₂+能量．在果醋制作时，运用醋酸菌在有氧和糖源充足时，将糖分解成醋酸．

Answer 1

分析 据图分析：A、B、C三个培养皿属于稀释涂布平板法接种，D培养皿是平板划线法接种．对目的微生物筛选时，稀释涂布平板法适用于对微生物的计数，用该方法进行计数时需要做对照试验以排除培养基污染造成的误差．

解答 解：（1）对微生物的分离常用稀释涂布平板法和平板划线法进行接种，但稀释涂布平板法适用于微生物的计数．据图分析D是平板划线法接种，不适用于微生物的计数．
（2）用该方法统计样本菌落数时需要设置对照组，因为因为需要判断培养基是否被杂菌污染（培养基灭菌是否合格）．
（3）检测尿素分解菌的存在与否，在以尿素为唯一氮源的选择培养基中加入酚红指示剂，观察是否变红．如果存在尿素分解菌，则指示剂将变红色．
（4）在微生物培养中，对培养基常用高压蒸汽灭菌方法进行灭菌．
（5）每升原水样中大肠杆菌数为：（55+56+57）÷3×10000×10³=5.6×10⁸个．根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出细菌数目往往比实际的数目低，原因是当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落．
（6）酵母菌发酵产生酒精的反应式为C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2C₂H₅OH+2CO₂+能量，在果醋制作时，利用醋酸菌在有氧和糖源充足时，将糖分解成醋酸．
故答案为：
（1）稀释涂布平板法　D　
（2）需要　因为需要判断培养基是否被杂菌污染（培养基灭菌是否合格）　
（3）选择　酚红　红
（4）高压蒸汽灭菌
（5）5.6×10⁸个  低
（6）C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2C₂H₅OH+2CO₂+能量　有氧

点评 本题主要考查微生物的接种计数与培养，意在强化学生对相关知识的理解与运用．