题目内容
用小鼠进行DNA重组研究中形成的“基因敲除”技术，能“敲除”DNA分子上的特定基因。该技术的主要过程如下：
第一步：分离小鼠胚胎干细胞，这些细胞中含有需要改造的基因，称“靶基因”。
第二步：获取与“靶基因”同源的DNA片断，利用特定技术在该DNA片段上插入neoR基因
（新霉素抗性基因）成为突变DNA（如下图），使该片段上的靶基因失活。
第三步：将插入neoR基因（新霉素抗性基因）的靶基因转移入胚胎干细胞，再通过同源互换，用失活靶基因取代两个正常靶基因中的一个，完成对胚胎干细胞的基因改造。
第四步：将第三步处理后的胚胎于细胞，转移到特定培养基中筛选培养。
 |
其基本原理如下图所示：
（1）第二步中neoR基因插入靶基因使用的工具酶是 。neoR基因不仅能使靶基因失活，还是 ；“靶基因失活”的含义是 。
（2）从研究者成功获得如上图所示的“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞，到将该细胞培育成“基因敲除”小鼠，运用到的生物技术有 、 、 等。
（3）科学家可以通过‘“基因敲除”技术来治疗疾病，上题中获得的基因敲除小鼠，能否直接用来研究基因功能并说明原因 ，
。
（1）限制酶、DNA连接酶 标记基因 靶基因不能正常表达
（2）克隆技术 转基因技术 细胞培养技术（合理给分）
（3）不能，因为该小鼠体内仍有一个正常的靶基因，也能表达性状。故不能得到靶基因的功能（2分）
