Question

12．如图为培育转基因抗虫棉的技术流程．请据图回答：

（1）进行过程①，先要运用的酶是限制酶，限制酶的特点是识别特定序列，切割特点位点．
（2）基因工程核心步骤的名称是基因表达载体的构建．
（3）③过程的培养基除含有必需的营养物质、琼脂外，还需要添加植物激素
（4）④过程的实质是基因选择性表达，过程③④所表达的两个重要的生理现象是脱分化和再分化．
（5）过程②采用最多的方法是农杆菌转化法．农杆菌中的Ti质粒上T-DNA具有把目的基因转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体DNA上的特点．把目的基因导入受体细胞，检测目的基因是否发挥功能作用的第一步是看目的基因是否转录出mRNA，检测时常用的方法是分子杂交．
（6）经检测抗虫棉细胞染色体上含有一个抗虫基因，该植株自交得到F₁，其中全部的抗虫植株再自交一次，后代中抗虫植株占总数的$\frac{5}{6}$．

Answer 1

分析 1、基因表达载体的构建是基因工程的核心．目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用．基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因．
2、农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上．
3、根据题意和图示分析可知：①是基因表达载体的构建过程，②是将目的基因导入受体细胞的过程，③是脱分化过程，④是再分化过程．

解答 解：（1）过程①是基因表达载体的构建过程，进行过程①时先要运用的酶是限制酶，限制酶的特点是识别特定序列，切割特点位点．
（2）基因工程核心步骤的名称是基因表达载体的构建．
（3）③是脱分化过程，其培养基除含有必需的营养物质、琼脂外，还需要添加植物激素如生长素和细胞分裂素．
（4）④过程的实质是基因选择性表达，过程③④所表达的两个重要的生理现象是脱分化和再分化．
（5）过程②是将目的基因导入受体细胞的过程，在植物基因工程中常用农杆菌转化法．农杆菌中的Ti质粒上T-DNA具有把目的基因转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体DNA上的特点．把目的基因导入受体细胞，检测目的基因是否发挥功能作用的第一步是看目的基因是否转录出mRNA，检测时常用的方法是分子杂交．
（6）抗虫棉细胞染色体上含有一个抗虫基因（用A表示），那么该植株可看做是杂合子（Aa），自交得到的F_l有三种基因型（AA、Aa、aa），如果其中全部的抗虫植株（$\frac{1}{3}$AA、$\frac{2}{3}$Aa）再自交一次，那么后代中不抗虫植株占$\frac{2}{3}$×$\frac{1}{4}$=$\frac{1}{6}$，抗虫植株占1-$\frac{1}{6}$=$\frac{5}{6}$．
故答案为：
（1）识别特定序列，切割特点位点
（2）基因表达载体的构建
（3）植物激素
（4）基因选择性表达   脱分化和再分化
（5）农杆菌转化法   把目的基因转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体DNA上   看目的基因是否转录出mRNA   分子杂交
（6）$\frac{5}{6}$

点评 本题考查基因工程及基因分离定律的相关内容，意在考查考生的识记能力、识图能力和理解应用能力．