Question

13．近期，思念、三全、湾仔码头等企业生产的速冻食品相继检出金黄色葡萄球菌超标，“细菌门”事件引起公众的普遍关注．请回答下列问题：
（1）某小组欲检测果汁类食品中是否含有金黄色葡萄球菌．经查资料：葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环．请完成下列实验步骤：
①配制培养基：称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl琼脂等，加入蒸馏水，搅拌加热至完全溶解后调节pH，分装到锥形瓶后灭菌，在无菌状态下加入卵黄液（100mL10%灭菌NaCl溶液中加一个鸡蛋黄，振荡均匀）摇匀，立即倒平板．
②接种：取待检果汁2.5mL加入到22.5mL的灭菌生理盐水中，制成接种样液．
实验组：将接种样液用平板划线法接种在含卵黄的固体培养基上．
对照组：将灭菌生理盐水用同样的方法接种在含卵黄的固体培养基上或不接种作空白对照．
将上述接种后的培养皿同时放在36℃的恒温箱中培养48h
③观察：观察培养基表面是否出现周围有乳浊环的菌落
（2）葡萄球菌能耐受高浓度的NaCl，所以在配制培养基时加入高浓度的NaCl可以将它分离出来．此培养基属于选择培养基．
（3）要统计每克果汁样品中活菌数目，宜采用稀释涂布平板法接种，根据果汁样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数目就能大约推测出样品中活菌数．

Answer 1

分析 微生物的分离
①利用该分离对象对某一营养物质的“嗜好”，专门在培养基中加入该营养物质，使该微生物大量增殖．这些物质主要是一些特殊的碳源、氮源，如纤维素可用来富集纤维素分解微生物，尿素可用来富集尿素分解微生物．
②利用该分离对象对某种抑制物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物质，经培养后，由于原来占优势的它种微生物的生长受到抑制，而分离对象却可趁机大量增殖，使之在数量上占优势．如筛选酵母菌和霉菌，在培养基中加入青霉素，因青霉素可抑制细菌和放线菌的细胞壁的合成，从而抑制两类微生物的生长，而酵母菌和霉菌正常生长增殖．

解答 解：（1）①配制培养基的过程是计算、称量、熔化、灭菌、倒平板．熔化后灭菌前要调节PH．
②由题干知实验目的是，欲检测果汁类食品中是否含有金黄色葡萄球菌，实验分两组，一个实验组，将接种样液用平板划线法接种在含卵黄的固体培养基上，另一组作为对照，将灭菌生理盐水用同样的方法接种在含卵黄的固体培养基上或不接种作空白对照．
③由题干知原理是葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环，所以观察的指标是否出现周围有乳浊环的菌落．
（2）配制培养基时加入高浓度的NaCl，只有能耐受高浓度NaCl的葡萄球菌能生长繁殖，不能耐受高浓度NaCl的微生物不能生长繁殖，所以属于选择培养基．
（3）统计每克果汁样品中活菌数目，宜采用稀释涂布平板法接种，根据果汁样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数目 就能大约推测出样品中活菌数．
故答案应为：
（1）①pH   灭菌    ②平板划线   灭菌生理盐水     ③是否出现周围有乳浊环的菌落
（2）选择
（3）稀释涂布平板    菌落数目

点评 本题是以“细菌门”事件为背景考查微生物的分离与培养，主要考查学生运用所学的知识解决实际问题的能力．