Question

16．请回答下列生物技术方面的问题．
（1）微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，后者是将菌液进行一系列的稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，再进行培养．菌落是在固体培养基上由单个细胞繁殖而来的形态可见的子细胞群体．
（2）菊花的组织培养的大致过程如图1所示，请回答下列问题：

图中B、C依次表示脱分化、再分化过程（填名称），添加的两种关键激素是生长素、细胞分裂素；．该实验操作成功的关键是无菌操作（或无菌技术），所以要对外植体、超净工作台等进行消毒，对培养基或培养器具等进行杀菌．
（3）同学乙利用凝胶色谱法进行血红蛋白的分离（如图2），他在操作中加样的正确顺序是④②①③．

Answer 1

分析 1、微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，前者是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，后者是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养．
2、植物组织培养是指离体的组织或器官在人工控制的培养基及环境条件下增殖分化成完整植株的一种无菌培养技术；基本过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进一步发育植株（新植体）．组织培养需用MS培养基，其成分包括大量元素、微量元素及植物激素和有机物．
3、血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：
（1）样品处理：①红细胞的洗涤（低速短时间离心），②血红蛋白的释放（需要加入蒸馏水和甲苯），③分离血红蛋白（中速长时间离心）．
（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析．
（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质．
（4）纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳．

解答 解：（1）微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，后者是将菌液进行一系列的稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，再进行培养，菌落是在固体培养基上由单个细胞繁殖而来的形态可见的子细胞群体．
（2）图中B、C依次表示脱分化、再分化过程，添加的关键激素是细胞分裂素、生长素．该实验操作成功的关键是无菌操作，所以要对外植体、超净工作台等消毒，对培养基或培养器具等进行灭菌．
（3）④正确的加样顺序可依据样品在色谱柱及凝胶层中的渗入量进行分析，可以得出是④①②③．
故答案为：
（1）稀释涂布平板法    稀释    培养    单个细胞
（2）脱分化、再分化   生长素、细胞分裂素    无菌操作（或无菌技术）     消毒    杀菌
（3）④②①③

点评 本题考查微生物的分离与培养、植物组织培养、血红蛋白的分离等相关知识，要求学生理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用；并对实验现象和结果进行解释、分析、处理．