Question

如图是将动物的生长激素基因导入细菌细胞内，产生“工程菌”的示意图．请据图回答：
（1）在“工程菌”细胞内，控制细菌合成胰岛素的基因、控制细菌主要性状的基因依次存在于

 

、

 

上．
（2）在构建重组运载体B的过程中，需要

 

种限制酶切割

 

个磷酸二酯键．
（3）将重组DNA分子导入细菌细胞，常用方法是

 

．
（4）在该工程中限制酶能识别的序列和切点是一G^↓GATCC一，请画出质粒被切割形成的黏性末端．

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：1、基因工程的工具有：限制性核酸内切酶、DNA连接酶和运载体．需要限制酶来切割以获取目的基因，同时需要相同的限制酶切割运载体以获取与目的基因相同的黏性末端，再通过DNA连接酶连接目的基因和运载体．将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法．标记基因的作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．
2、分析题图：图示是将动物的生长激素基因导入细菌细胞内，产生“工程菌”的过程，其中A表示动物的生长激素基因，B表示基因表达载体．

解答： 解：（1）在“工程菌”细胞内，控制细菌合成胰岛素的基因存在于重组质粒上，控制细菌主要性状的基因存在于核区大型环状DNA上．
（2）切割质粒和含有目的基因的DNA片段可用同种限制酶，以产生相同的黏性末端．获取一个目的基因需限制酶剪切两次，切割4个磷酸二酯键，切割质粒需限制酶剪切一次，切割2个磷酸二酯键．因此在构建重组运载体B的过程中，需要同（一）种限制酶切割6个磷酸二酯键．
（3）将重组DNA分子导入细菌细胞，常用方法是钙离子处理，增大细菌细胞壁的通透性，使细菌变成感受态细胞．
（4）在该工程中限制酶能识别的序列和切点是一G^↓GATCC一，则质粒被切割形成的黏性末端为．
故答案为：
（1）重组质粒            核区大型环状DNA
（2）同（一）             6
（3）钙离子
（4）（见右图）

点评：本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或的能力．要注意，获取目的基因和切割载体时使用同种限制酶，目的是产生相同的黏性末端．获取一个目的基因需限制酶剪切两次，共产生 4个黏性末端或平末端．限制酶切割位点的选择必须保证标记基因的完整性，以便于检测．