Question

9．2014年11月14日，第三军医大援利医疗队从北京出发前往利比亚，帮助防控埃博拉疫情，埃博拉病毒（EBO）呈纤维状，是一种烈性的、泛嗜性的RNA病毒，它首先破坏吞噬细胞，其次是肝、脾等细胞，进而导致血管通透性增加，出现严重的出血热现象，EBO衣壳上的包膜蛋白能被宿主细胞强烈识别，请回答下列相关问题：
（1）人体感染EBO后，血液中可检测到相应抗体，抗体由浆细胞产生，但感染者的血清中很难形成高浓度的抗体，这是因为病毒侵染并破坏巨噬细胞，影响抗原呈递，阻断了体液免疫的发生．
（2）EBO基因组为单股负链RNA，负链RNA的互补链才能与核糖体结合，进而翻译出蛋白质，该过程是否符合遗传信息传递的中心法则？是（填“是”或“否”）．
（3）当前研发抗EBO的疫苗仍是主要的预防手段，图1表示转基因技术生产EBO蛋白疫苗的基本过程，图2中neo是新霉素抗性基因，amp表示氨苄青霉素抗性基因，ori是质粒的复制子，限制酶BamHⅠ、HindⅡ、PstⅠ、BgLⅡ作用位点如图3．
①图1中的目的基因是包裹蛋白基因，此方法制备的疫苗比直接利用病毒研制疫苗的方法更安全，其原因是蛋白质不具侵染性，不会破坏细胞结构．
②要能在大肠杆菌中不断表达目的基因，同时又能提高重组效率，选择的限制酶是BglII、BamHI．
③要筛选出成功导入重组质粒的大肠杆菌，并准确定位所需大肠杆菌的菌落，实验室至少需要两种培养基，他们分别是只含两种抗生素的培养基和只含新霉素的培养基两种培养基．

Answer 1

分析 分析题图：
图1：图1表示转基因技术生产EBO蛋白疫苗与重组病毒粒子疫苗的基本过程．
图2：图6是质粒结构示意图，其中neo是新霉素抗性基因，amp表示氨苄青霉素抗性基因，ori是质粒的复制子，该质粒中有限制酶BamHⅠ、HindⅢ、PstⅠ、BglⅡ的作用位点．
图3：图3是含有目的基因的外源DNA分子．

解答 解：（1）抗体是由浆细胞分泌的，由于病毒侵染并破坏巨噬细胞，影响抗原呈递，阻断了体液免疫的发生，所以感染者的血清中很难形成高浓度的抗体．
（2）EBO基因组为单股负链RNA，负链RNA的互补链才能与核糖体结合，进而翻译出蛋白质，说明该过程符合遗传信息传递的中心法则，EBO基因在人体细胞内表达蛋白质的过程是：RNA→RNA→蛋白质．
（3）①根据题干信息和图1可知该基因工程的目的基因是包裹蛋白基因，通过该过程合成的蛋白质不具侵染性，不会破坏细胞结构，所以比直接利用病毒研制疫苗的方法更安全．
②质粒中含有限制酶BamHⅠ、HindⅢ、PstⅠ、BglⅡ作用位点，但若用限制酶HindⅢ切割会破坏目的基因，若用限制酶PstⅠ切割会破坏复制子，因此，要能在大肠杆菌中不断表达目的基因，同时又能提高重组效率，选择的限制酶是BglII、BamHI．
③用限制酶BglII、BamHI切割会破坏氨苄青霉素抗性基因，但不会破坏新霉素抗性基因，因此要筛选出成功导入重组质粒的大肠杆菌，并准确定位所需大肠杆菌的菌落，实验室至少需要两种培养基，他们分别是含两种抗生素的培养基和只含新霉素的培养基．
故答案为：
（1）浆细胞    病毒侵染并破坏巨噬细胞，影响抗原呈递，阻断了体液免疫的发生
（2）是
（3）①包裹蛋白基因 蛋白质不具侵染性，不会破坏细胞结构
②BglII、BamHI
③只含两种抗生素的培养基和只含新霉素的培养基

点评 本题结合图解，考查基因工程和细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具、操作步骤，掌握各步骤的相关细节；识记单克隆抗体的制备过程，能结合图中和题中信息准确答题，综合性较强，有一定难度．