Question

15．绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒（TMV）基因，可以合成一种抗TMV 蛋白，叶片对TMV 具有抗感染性．烟草是具有重要经济价值的双子叶植物，由于TMV 的感染会导致大幅度减产．研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV 的烟草，主要流程如图所示．

（1）理论上，基因组文库含有生物的全部基因；而cDNA 文库中含有生物的部分基因．
（2）科学家从绞股蓝细胞中提取抗TMV 基因转录的RNA，然后合成目的基因．图中①过程表示反转录．
（3）④过程将重组Ti 质粒导入烟草体细胞的常用方法是农杆菌转化法．
（4）由图分析，在过程③构建的重组Ti 质粒上应该含有的标记基因是卡那霉素抗性基因，它的作用是具有鉴定和筛选导入目的基因成功的受体细胞的作用．
（5）过程⑥可采取抗原-抗体杂交的方法，检测植株是否合成了抗TMV 蛋白．在个体水平的鉴定过程中，可通过接种烟草花叶病毒的方法来确定植株是否具有抗性．

Answer 1

分析 1、基因文库是指将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入到受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因．
基因组文库包含某种生物所有的基因；部分基因文库包含某种生物的部分基因．如：cDNA文库．
2、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
3、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）基因组文库含有某种生物的全部基因；cDNA文库中只含有该种生物的部分基因．
（2）过程①表示获得的目的基因，是RNA通过反转录获得DNA．
（3）将目的基因导入植物细胞的常用的方法有农杆菌转化法．
（4）过程⑤添加卡那霉素的作用是筛选含有目的基因的重组质粒．可推知过程③构建的重组Ti 质粒上应该含有的标记基因是卡那霉素抗性基因，具有鉴定和筛选导入目的基因成功的受体细胞．
（5）过程⑥需要对表达的产生进行鉴定，可采取抗原-抗体杂交，可检测植株是否合成了抗TMV蛋白；若从个体水平鉴定，可通过接种烟草花叶病毒的方法来确定植株是否具有抗性．
故答案为：
（1）全部  部分    
（2）反转录     
（3）农杆菌转化法
（4）卡那霉素抗性      鉴定和筛选导入目的基因成功的受体细胞
（5）抗原-抗体杂交     接种烟草花叶病毒

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因文库的种类，掌握两种基因文库的区别；识记PCR技术的条件；识记基因工程的具体操作步骤及相关细节，能结合所学的知识准确答题．