Question

5．下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题．步骤如下：
A．制备稀释倍数为10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶的系列稀释液．
B．如下图是采用纯化酵母菌培养的两种接种方法接种后培养的效果图．

（1）对大肠杆菌进行数量测定选用图[A]稀释涂布平板法接种样品．
结果分析：
（2）一同学在稀释倍数为10⁵的培养基中测得平板上菌落数的平均值为43.4，那么每毫升样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL）4.34×10⁷．
（3）用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量多，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落．

Answer 1

分析 1、平板划线法是接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的造作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面，在数次划线之后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的子细胞群体-菌落；稀释涂布平板法是将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同梯度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基上，进行培养获得由单细胞繁殖而来的菌落．
2、对微生物进行分离、计数常用的接种方法是稀释涂布平板法，估算每毫升样品中的细菌数时，往往选取30～300的平板，取至少三个平板的平均值，每毫升样品中的细菌数=（平板的平均菌落数÷涂布的体积）×稀释的倍数；由于当两个或多个细胞连在一起时平板上观察的是一个菌落，因此估算的菌落数少于实际菌落数．
3、微生物培养过程中要严格遵循无菌操作．

解答 解：（1）测量大肠杆菌数量常用的接种方法是稀释涂布平板法，即图中的A．
（2）每毫升样品中的细菌数是=（平板的平均菌落数÷涂布的体积）×稀释的倍数=（43.4÷0.1）×10⁵=34.34×10⁷个．
（3）由于当两个或多个细胞连在一起时平板上观察的是一个菌落，因此实际菌落数多于估算的菌落数．
故答案为：
（1）A  稀释涂布平板法          
（2）4.34×10⁷
（3）多  当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落

点评 本题的知识点是微生物培养过程，分离微生物和统计活菌数常用的常用方法，主要考查学生设计和完善实验步骤，分析实验结果获取结论的能力和提出问题进行进一步探究的能力，利用所学的微生物知识解决生活问题的能力．