Question

5．降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等．某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如图：获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点  ）和BamHⅠ（识别序列和切割位点 ）双酶切后插入大肠杆菌质粒中．下列有关分析错误的是（　　）

• A． Klenow酶是一种DNA聚合酶
• B． 鉴定和选择重组质粒，需要大肠杆菌质粒中含有标记基因
• C． EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是将目的基因连接进入载体，并且用不同的酶可以固定连接方向
• D． 合成的双链DNA有72个碱基对

Answer 1

分析 分析图解：图为人工合成的方法获取目的基因，观察图可以发现通过Klenow酶能够将单链DNA延伸，并且中间形成18个碱基对，则两侧分别有（72-18）=54个碱基．由于EcoRⅠ和BamHⅠ的识别序列和切点不同，所以用EcoRⅠ和BamHⅠ同时切割，目的基因两侧形成的黏性末端不同，载体也是，这样可以保证目的基因和载体定向连接，形成重组质粒．

解答 解：A、根据题意“两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA”可知Klenow酶是以DNA单链为模板，使子链延长的DNA聚合酶，A正确；
B、筛选重组质粒需要大肠杆菌质粒中含有标记基因，B正确；
C、用不同的酶切可以产生不同的黏性末端，有利于目的基因和运载体的定向连接，C正确；
D、根据“人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段”可推出合成的DNA双链碱基对是72×2-18=126个碱基对，D错误．
故选：D．

点评 本题难度适中，属于考纲中理解层次的要求，以“降钙素”为素材，考查基因工程、胚胎移植和蛋白质工程等知识，意在考查考生对所学知识的掌握、获取图文信息能力和分析推理能力的培养．