Question

【题目】尿素是一种重要的农业肥料，需经细菌的分解才能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问题，请分析回答：

（1）上图是利用________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步________到培养基的表面。

（2）下面是两种培养基配方

表1：A培养基配方

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4· 7H2O	葡萄糖	尿素	琼脂	H2O
1.4 g	2.1 g	0.2 g	10.0 g	1.0 g	15.0 g	1000 mL

表2：B培养基配方

纤维素粉	NaNO3	Na2HPO4· 7H2O	KH2PO4	MgSO4· 7H2O	KCl	酵母浸膏	H2O
5 g	1 g	1.2 g	0.9 g	0.5 g	0.5 g	0.5 g	1000 mL

①配制培养基的操作步骤________(用字母顺序回答)。

a．倒平板　b．计算　c．溶化　d．称量 e．灭菌

②通常培养基采用________灭菌，在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒置，目的是______________________。

③如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择上述__________(A、B)配方的培养基，在该培养基中加入________指示剂，可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。

④据B培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是______________________。

Answer 1

【答案】平板划线 稀释(分散、分离) bdcea 高压蒸汽灭菌法 防止培养皿内壁上出现的冷凝水污染培养基 A 酚红 异养型

【解析】

1、微生物常见的接种的方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种、划线，在恒温箱里培养，在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

2、选择培养基是根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率。

（1）由图可知，主要利用平板划线法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。

（2）①配制培养基的操作步骤为：计算各组分配比—称量—加水溶解—高温灭菌—倒平板，故本题正确答案为bdcea。

②通常培养基采用高压蒸汽法灭菌，在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒置，否则培养皿内壁上出现的冷凝水可能污染培养基。

③如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择富含尿素的培养基，即A培养基。在该培养基中加入酚红指示剂，可以检测是否有脲酶的分泌，可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。

④因为B培养基中有酵母浸膏，可以为微生物生长提供能量，所培养微生物的同化作用类型为异养型。