Question

9．在培育抗除草剂转基因烟草过程中，下列操作错误的是（　　）

• A． 用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸
• B． 用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和运载体
• C． 将重组DNA分子通过农杆菌转化法导入烟草细胞
• D． 用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞

Answer 1

分析 1、基因工程的工具：
（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．
（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．
2、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：A、限制酶只能切割特定的脱氧核苷酸序列，而烟草花叶病毒的核酸是RNA，因此限制酶不能切割烟草花叶病毒的核酸，A错误；
B、用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和运载体以形成重组质粒，B正确；
C、将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，C正确；
D、用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞，D正确．
故选：A．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确判断各选项．