题目内容

基因工程是在DNA水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补的步骤的是 …?（　　）?

A.目的基因与运载体结合　 B.将目的基因导入受体细胞?

C.目的基因的检测　　　　　　 D.目的基因的表达?

在基因操作的4个基本步骤中，形成重组DNA分子以及目的基因检测和表达过程，均存在碱基互补配对，只有目的基因导入受体细胞不需要碱基互补配对。?

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下列有关基因工程的叙述中正确的是

[　　]

A．

基因工程是在DNA分子水来上进行设计施工，被施工的DNA分子的直径是2.1 μm

B．

为使质粒顺利进入受体细胞细菌内，一般可用氯化钠处理细菌，以增大细胞壁的通透性

C．

一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列

D．

限制性内功酶只在获得目的基因时才用

7．(广东高考)

(1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生____________，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间的____________表示。

(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如图：

发酵液离心Ｋ菌体去除Ｋ含酶的

发酵液Ｋ透析Ｋ透析液(Ⅰ)去除Ｋ粗提物(Ⅱ)纯化Ｋ纯酶

　Ⅰ中的主要成分为____________； Ⅱ中包含植酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。

(3)为构建基因工程菌，可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包括多次循环，每次循环包括三步：____________。反应过程中打开模板DNA双链的方法是__________________________。

(4)除植酸酶外，微生物还能应用在哪些酶的生产中？(至少写两种)

7．(广东高考)

(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如图：

发酵液离心Ｋ菌体去除Ｋ含酶的

发酵液Ｋ透析Ｋ透析液(Ⅰ)去除Ｋ粗提物(Ⅱ)纯化Ｋ纯酶

　Ⅰ中的主要成分为____________； Ⅱ中包含植酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。

(4)除植酸酶外，微生物还能应用在哪些酶的生产中？(至少写两种)

（14分）回答有关生物工程的问题：
（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生__末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_（相同不同）粘性末端的限制酶。
（2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是提供________特异性识别结合位点，驱动基因转录。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用___处理大肠杆菌，以利于表达载体进入：为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与__________杂交，该杂交技术称为_________。
（3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的______中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将_____插入植物细胞的染色体___上。
(4)家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。
(5)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。改PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。
(6)利用生物反应器培养家蚕细胞时，细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_________________增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。

下列有关基因工程的叙述中正确的是

A.
基因工程是在DNA分子水来上进行设计施工，被施工的DNA分子的直径是2.1 μm
B.
为使质粒顺利进入受体细胞细菌内，一般可用氯化钠处理细菌，以增大细胞壁的通透性
C.
一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
D.
限制性内功酶只在获得目的基因时才用

下列有关基因工程的叙述中正确的是

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