Question

【题目】肥胖已经严重危害人类健康．为研究发酵大麦提取物对3T3﹣L1前脂肪细胞分化的影响，科研人员进行了相关实验．
（1）3T3﹣L1前脂肪细胞在胰岛素（INS）、地塞米松（DEX）和3﹣异丁基﹣1﹣甲基﹣黄嘌呤（IBMX）的诱导下，基因表达，分化为成熟脂肪细胞，因此经过三种物质诱导的3T3﹣L1前脂肪细胞是肥胖研究常用的细胞模型．
（2）3T3﹣L1前脂肪细胞培养液中除了具有基本的营养外，还需加入一定量的 ， 并置于中培养．
（3）将一定数目的植物乳杆菌接种到经过处理的粉碎过筛大麦和水的混合液中，制备发酵大麦提取物（LFBE）．除不接种植物乳杆菌外，其余操作方法相同，制备未发酵大麦提取物（RBE）．
（4）研究发酵大麦提取物对细胞分化的影响，实验处理及结果如下．（表格中+表示加入了该物质，﹣表示未加入）

组别 处理方法	模型组	空白组	对照组（提取物浓度ug/mL）			实验组（提取物浓度ug/mL）
			100	200	400	100	200	400
培养液	+	+	+	+	+	+	+	+
1	+	﹣	﹣	﹣	﹣	﹣	﹣	﹣
2	﹣	﹣	+	+	+	﹣	﹣	﹣
3	﹣	﹣	﹣	﹣	﹣	+	+	+

表格处理方法1，2，3分别是、、 ．
②分析实验结果，说明 ．
（5）为进一步研究LFBE抑制3T3﹣L1前脂肪细胞分化的机理，科研人员提取各组细胞中总RNA，经过程获得cDNA，再利用PCR技术扩增出肥胖相关基因．在相同条件下，PCR产物的量可以间接反映细胞中的含量．若检测结果是 ， 则说明LFBE抑制相关基因转录从而抑制3T3﹣L1前脂肪细胞分化．

Answer 1

【答案】
（1）选择性
（2）动物血清（可换成抗生素以防止污染）；CO2（恒温）培养箱
（3）（高压蒸汽）灭菌
（4）INS．DEX．IBMX；RBE；LFBE；LFBE明显抑制3T3﹣L1前脂肪细胞分化且随浓度增加，抑制能力加强
（5）逆转录；肥胖相关基因mRNA；LFBE组肥胖相关基因mRNA数量明显低于模型组和RBE组，高于空白组
【解析】解：（1）细胞分化是基因选择性表达的结果．（2）细胞培养液中除了具有基本的营养外，还需加入一定量的动物血清（可换成抗生素以防止污染），并置于 CO2（恒温）培养箱中培养．（3）培养基需要高压蒸汽灭菌．（4）①本实验是研究发酵大麦提取物对细胞分化的影响，根据题（1）中“3T3﹣L1前脂肪细胞在胰岛素（INS）、地塞米松（DEX）和3﹣异丁基﹣1﹣甲基﹣黄嘌呤（IBMX）的诱导下，分化为成熟脂肪细胞”题（3）中“植物乳杆菌接种到粉碎过筛大麦和水的混合液中，制备发酵大麦提取物（LFBE）”等相关信息可推知，表格处理方法1、2、3分别是INS．DEX．IBMX、RBE、LFBE．②根据柱形图，分析实验结果，说明LFBE明显抑制3T3﹣L1前脂肪细胞分化率且随浓度增加，抑制能力加强．（5）RNA经逆转录过程获得cDNA．PCR产物的量可以间接反映细胞中肥胖相关基因mRNA的含量．若检测结果是 LFBE组肥胖相关基因mRNA数量明显低于模型组和RBE组，高于空白组，则说明LFBE抑制相关基因转录从而抑制3T3﹣L1前脂肪细胞分化． 所以答案是：（1）选择性（2）动物血清（可换成抗生素以防止污染） CO2（恒温）培养箱（3）（高压蒸汽）灭菌（4）①INS．DEX．IBMX、RBE、LFBE ②LFBE明显抑制3T3﹣L1前脂肪细胞分化且随浓度增加，抑制能力加强（5）逆转录 肥胖相关基因mRNA LFBE组肥胖相关基因mRNA数量明显低于模型组和RBE组，高于空白组
【考点精析】掌握细胞分化的基础和实质和动物细胞与组织培养过程是解答本题的根本，需要知道在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异，产生不同的细胞类群差异的过程；细胞分化是基因选择性表达的结果；取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养．