Question

某质粒和含抗盐基因的DNA片段上均有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制性核酸内切酶酶切位点，同时质粒上还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因（如图）．下列相关叙述错误的是（　　）

• A、SalⅠ酶切后可产生质粒-质粒、质粒-抗盐基因和抗盐基因-抗盐基因三种两两连接产物
• B、用SalⅠ和HindⅢ两种限制性核酸内切酶切可保证质粒与抗盐基因的定向连接
• C、用BamHⅠ和SalⅠ两种限制性核酸内切酶切得不到含目的基因的重组质粒
• D、在同时添加氨苄青霉素和四环素的培养基中可筛选得到含重组质粒的受体细胞

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：分析题图：质粒和含抗盐基因的DNA片段上均有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制性核酸内切酶酶切位点．在质粒上，这三种限制酶的切割位点都位于抗四环素基因上，用其任何一种酶都会破坏四环素抗性基因；在含抗盐基因的DNA片段上，BamHⅠ位于目的基因上，用BamHⅠ切割会破坏目的基因．

解答： 解：A、用一种限制酶SalⅠ酶质粒和含有目的基因的外源DNA分子所产生的黏性末端相同，用DNA连接酶连接时可产生三种连接产物，A正确；
B、SalⅠ和HindⅢ两种限制性核酸内切酶的识别序列不同，切割产生的黏性末端不同，所以用DNA连接酶连接时能保证质粒与抗盐基因的定向连接，B正确；
C、用BamHⅠ限制酶切割会破坏目的基因（抗盐基因），因此用BamHⅠ和SalⅠ两种限制性核酸内切酶切得不到含目的基因的重组质粒，C正确；
D、用上述限制酶切割质粒，其上的抗四环素基因都会被破坏，所以在添加四环素的培养基中不能筛选得到含重组质粒的受体细胞，D错误．
故选：D．

点评：本题结合题图考查基因工程的相关知识，特别是基因表达载体的构建过程，要求考生明确该步骤需要限制酶和DNA连接酶，至于需要哪种或哪几种限制酶，需要考生分析题图，选择的限制酶要能切割含有目的基因的外源DNA分子和质粒，但不能破坏目的基因．需要考生的注意的是B选项，选择这两种限制酶切割可以保证质粒与抗盐基因的定向连接．