Question

【题目】Ⅰ.如图：若以甲肝病毒表面抗原的基因为目的基因，以农杆菌的Ti质粒为载体构建基因表达载体，请分析回答：切割质粒时，应使用限制酶___________；成功建构的重组质粒上含有_______个限制酶C的识别位点。甲肝病毒表面抗原基因插入受体细胞的染色体DNA上是否表达，通常采用_________的方法进行检测。

Ⅱ.单克隆抗体相对传统方法制备的抗体，其优点有_______________；

相对化疗，用“生物导弹”治疗癌症的优点是___________________。

相对杂交育种，植物体细胞杂交技术在育种上的优点是___________。

Ⅲ.下列有关胚胎工程的示意图，分析回答：图中的早期胚胎通常处于____________阶段。在形态上，ES细胞具有体积小、_________的特点。

Answer 1

【答案】酶A和酶B2抗原-抗体杂交特异性强、灵敏度高、可大量制备疗效高、毒副作用小克服远缘杂交不亲和障碍桑椹胚或囊胚细胞核大、核仁明显

【解析】

限制性内切酶能识别DNA分子上特定的序列和切点并进行切割，限制性内切酶具有专一性，即一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列。被限制内切酶切开的DNA两条单链切口，各含有几个伸出的、可互补配对的核苷酸，这种切口就是黏性末端。黏性末端之间，只要切口处伸出的核苷酸间存在互补关系，就能在DNA连接酶的作用下连接起来。单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，通常采用杂交瘤技术来制备。胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。

I．分析三种酶的识别序列和切割位点以及目的基因两侧的碱基序列可知，在目的基因的上游具有酶B的识别序列，下游有酶C的识别序列，即获取目的基因时，应使用限制酶B和酶C；而目的基因应插入到质粒的T-DNA中，因此切割质粒时，应使用限制酶A和酶B；质粒上原本就有一个酶C的识别位点，而目的基因的酶C切割的黏性末端和质粒的酶A切割的黏性末端连接后，形成的序列也能够被酶C识别，因此成功建构的重组质粒上含有2个限制酶C的识别位点。甲肝病毒表面抗原基因插入受体细胞的染色体DNA上是否表达，通常采用抗原-抗体杂交的方法进行检测。

II．传统方法产生的抗体种类繁多（尽管是单一抗原刺激），所以想要提取所需单一抗体极为困难，而单克隆抗体是由单一杂交瘤细胞产生，与传统方法制备的抗体相比其优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备。生物导弹的概念是细胞靶向治疗，相对化疗其优点是疗效高、毒副作用小。植物体细胞杂交可以将不同种的植物细胞融合成一个细胞，再利用植物组织培养技术将细胞培育成植株的过程，所以该方法打破了生殖隔离，克服了不同物种间远源杂交不亲和的障碍。

Ⅲ. 胚胎发育通常是指从受精卵起到胚胎出离卵膜的一段过程，卵细胞受精以后即开始分裂、分化，形成胚泡，先形成的细胞团为桑椹胚，然后形成囊胚，最后形成原肠胚，图中的早期胚胎通常处于桑椹胚或囊胚阶段。ES细胞也称胚胎干细胞：胚胎干细胞是早期胚胎（原肠胚期之前）或原始性腺中分离出来的一类细胞。ES细胞具有与早期胚胎细胞相似的形态结构，在形态上，具有体积小、细胞核大、核仁明显的特点。