Question

科学家将绿色荧光蛋白（GFP）基因转入小鼠胚胎干细胞（ES）内，GFP基因表达就会使细胞带有绿色荧光的，继而利用带有绿色荧光的ES细胞培育出嵌合型的小鼠用于科学研究，流程如图．请回答：

（1）在步骤①中，若绿色荧光蛋白（GFP）基因是cDNA片段，则在GFP基因的上游必须加入

 

，该核苷酸序列是

 

酶识别和结合的部位．
（2）步骤②的受体细胞是小鼠ES细胞，ES细胞一般从囊胚的

 

分离得到．在培养ES细胞时，细胞充满培养皿底部后停止分裂，这种现象称为

 

．
（3）为获取更多卵母细胞，首先要对供体母鼠注射促性腺激素，使其

 

，然后可用人工方法从小鼠输卵管内获得，该过程称为

 

．
（4）图中重组囊胚在步骤⑤之前要先检测是否有

 

，再通过

 

技术移入代孕母鼠子宫内继续发育．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,胚胎移植

专题：

分析：分析题图：图示为是转基因绿色荧光嵌合小鼠的培育过程，其中①表示基因表达载体的构建过程；②表示将目的基因导入受体细胞的过程；③表示受精作用；④表示早期胚胎发育过程；⑤表示胚胎移植过程；⑥表示妊娠产生转基因鼠的过程．

解答： 解：（1）在步骤①中，若绿色荧光蛋白（GFP）基因是cDNA片段，cDNA片段中没有启动子，而基因表达载体的组成中必需要有启动子，故在GFP基因的上游必须加入启动子，该核苷酸序列是RNA聚合酶识别和结合的部位．
（2）步骤②的受体细胞是小鼠ES细胞，ES细胞一般从囊胚的内细胞团分离得到．在培养ES细胞时，细胞充满培养皿底部后停止分裂，这种现象称为接触抑制．
（3）为获取更多卵母细胞，首先要对供体母鼠注射促性腺激素，使其超数排卵，然后可用人工方法从小鼠输卵管内获得，该过程称为冲卵．
（4）图中重组囊胚在步骤⑤之前要先检测是否有绿色荧光细胞，再通过胚胎移植技术移入代孕母鼠子宫内继续发育．
故答案为：
（1）启动子        RNA聚合
（2）内细胞团      接触抑制
（3）超数排卵       冲卵
（4）绿色荧光细胞          胚胎移植

点评：本题结合转基因鼠的培育过程示意图，考查了基因工程、动物细胞工程、胚胎工程等多个现代生物技术，意在考查考生的识记能力和综合运用能力．考生要能够把握所学知识的内在联系，识记相关知识点，如：基因表达载体的构成、胚胎干细胞的动物细胞培养技术的过程；考生还要能够明确动物细胞培养和胚胎移植技术在动物基因工程中的应用．