题目内容
【题目】人参是一种名贵药材，具有良好的滋补作用。口服α-干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ为限制酶，它们的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：
（1）步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是_________________。科研人员还在两种引物的一端分别加上了______________和_____________序列，以便于后续的剪切和连接。
（2）过程②所构建的基因表达载体中未标注出的必需结构还有_________________，过程③中需先用_________处理农杆菌，以便将基因表达载体导入细胞。
（3）过程④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过________________过程获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是______________________________________。
（4）治疗中发现，用于口服的α-干扰素在胃中会受到一定程度的破坏，影响其功效，需要利用__________________________技术加以改造，以达到满意效果。
【答案】
（1）干扰素基因两端的部分核苷酸序列 GAATTC GGATCC
（2）复制原点 Ca2+
（3）逆转录 干扰素基因未能导入人参愈伤组织细胞或导入人参愈伤组织细胞的干扰素基因未能转录（4）蛋白质工程
【解析】
（1）设计引物序列的主要依据是干扰素基因两端的部分核苷酸序列。后期需要用限制酶进行切割，所以在两种引物的一端分别加上了GAATTC和GGATCC序列。
（2）构建的基因表达载体中还需要复制原点。过程③中需先用Ca2+理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
（3）RNA通过逆转录形成DNA，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是干扰素基因未能导入人参愈伤组织细胞或导入人参愈伤组织细胞的干扰素基因未能转录
（4）对α-干扰素进行改造需要利用蛋白质工程
