[题目]巴氏芽孢杆菌是一类具有较高脲酶活性.能够分解尿素的细菌.广泛分布在土壤.堆肥及污水中.这种细菌能够将氮肥中的尿素分解成氨态氮被植物吸收.对土壤的肥力有着重要作用.研究人员拟从土壤样品中分离该类细菌.下图所示为操作流程.①~⑤表示操作步骤.请回答下列问题:(1)配制培养基时.按照培养基配方准确称量各组分.将其溶解.定容后.调节培养基的 .� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

【题目】巴氏芽孢杆菌是一类具有较高脲酶活性，能够分解尿素的细菌，广泛分布在土壤、堆肥及污水中。这种细菌能够将氮肥中的尿素分解成氨态氮被植物吸收，对土壤的肥力有着重要作用。研究人员拟从土壤样品中分离该类细菌，下图所示为操作流程，①~⑤表示操作步骤。请回答下列问题：

（1）配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的__________，及时对培养基进行分装，并进行_______灭菌。

（2）步骤②富集培养所使用的培养基按用途来分应为_____培养基，步骤②的主要目的是_____。

（3）在步骤④的培养基中加入______试剂，根据培养基是否变红来鉴定是否为尿素分解菌。若用该方法培养设置了3个培养皿，菌落数分别为163个、158个、159个，则可以推测富集培养后的菌液中每毫升含细菌数为______个，运用这种方法统计的结果往往较实际值_________。

（4）要进一步分离纯化巴氏芽孢杆菌采用步骤⑤_______法进行操作，在该操作过程中接种工具至少要灼烧______次。

【答案】pH 高压蒸汽（湿热）选择增加巴氏芽孢杆菌的浓度（数量）酚红 1.6×106 偏低平板划线 6

【解析】

据图可知，富集培养后的培养液稀释了1000倍，步骤④中涂布的稀释液体积为0.1ml，步骤⑤为平板划线。

（1）配置固体培养基的基本步骤是计算、称量、溶化、调pH、分装、灭菌，培养基灭菌一般采取高压蒸汽灭菌。

（2）步骤②富集培养目的是增加培养液中巴氏芽孢杆菌的浓度，所使用的培养基应以尿素为唯一碳源，按用途来分应为选择培养基。

（3）鉴定是否为尿素分解菌，可在步骤④的培养基中加入酚红试剂，尿素分解产生的氨会使培养基呈红色。用该方法培养设置了3个培养皿，菌落数分别为163个、158个、159个，则平均菌落数为（163+158+159）/3=160，则富集培养后的菌液中每毫升含细菌数为160÷0.1×1000=1.6×106个，由于个别菌落可能是由2个或多个细菌形成的，运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小。