Question

3．金黄色葡萄球菌具有高度耐盐性，在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色．下面是某研究小组测定自来水中金黄色葡萄球菌浓度的实验操作．
（1）金黄色葡萄球菌的培养基为7.5%NaCl牛肉膏蛋白胨培养基，根据实验目的应选择固体（填“固体”、或“液体”）培养基；不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间．霉菌一般在25-28℃的温度下培养3-4d．
（2）在制作血平板时需等平板冷却后，方可加入血液，以防止高温破坏血细胞．
（3）取10mL自来水样，加入90mL无菌水，稀释成10^-1的自来水样，依次操作，制作稀释10^-2、10^-3、10^-4的自来水样．
（4）将0.1mL10 ^-1〜10^-4的四个稀释样液，分别接种到4组（每组3个）血平板上的方法是稀释涂布平板法．在血平板上，金黄色葡萄球菌菌落的周围会出现透明圈（溶血圈）．若在10^-3组的3个血平板上，黄色葡萄球菌菌落数分别为40、36和35，则每升自来水中的活菌数约为3.7×10⁸个．

Answer 1

分析 1、微生物的营养物质有5类，分别是水、无机盐、碳源、氮源及生长因子．
2、培养基按功能分为选择培养基和鉴别培养基：
①选择培养基：培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物生长，培养、分离出特定的微生物（如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐）
②鉴别培养基：根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品，鉴别不同种类的微生物，如可用伊红-美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌（若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽）
3、接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体--菌落．

解答 解：（1）7.5%NaCl不影响金黄色葡萄球菌生长的同时抑制其它菌的生长，因此培养基中加入7.5%NaCl利于金黄色葡萄球菌的筛选，则该培养基属于选择培养基，选择培养基属于固体培养基．不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间．霉菌一般在22～28℃的温度下培养3～4天．
（2）在制作血平板时需等平板冷却后，方可加入血液，以防止高温破坏血细胞．
（3）取10mL自来水样，加入90mL无菌水稀释成10^-1稀释自来水样，依次操作，制作10^-2、10^-3、10^-4稀释自来水样．
（4）将0.1mL 10^-l～10^-4的四个稀释样液，分别接种到4组（每组3个）血平板上的方法是稀释涂布平板法．根据题意，“金黄色葡萄球菌在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色”，因此在血平板上，金黄色葡萄球菌菌落的周围会出现透明圈（溶血圈）．若在10^-3组的3个血平板上，金黄色葡萄球菌菌落数分别为40、36和35，则每升（1L=10³ml）自来水中的活菌数约为（40+36+35）÷3÷10^-3×10³×10=3.7×10⁸．
故答案为：
（1）固体          25-28          3-4
（2）高温破坏血细胞
（3）90
（4）稀释涂布平板法      透明圈（溶血圈）    3.7×10⁸

点评 本题考查了微生物的分离与培养的有关知识，要求考生能够掌握培养基配置的方法以及类型，明确选择培养基中特殊化学成分的作用以及物理性质，掌握稀释涂布平板法的操作步骤等．