Question

20．为了调查赣江的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作．回答下列问题：
（1）制备实验所需的培养基时，在各成分都溶化后和分装前，要进行的是调整pH和灭菌，对培养基进行灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌．倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染．
（2）该小组可采用上图②所示的稀释涂布平板法（方法）检测水样中的细菌含量．在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每升水样中的活菌数．
（3）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌．操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线．这样做的原因是将聚集的菌体逐步稀释，最终可以达到不连续单个菌落的目的．
（4）在纯化过程中，在固体培养基上划线分离过程中，正确的操作是D．
A．每次划线时，接种环都需要蘸菌液一次
B．划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种
C．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连
D．在超净平台中进行接种时，不能关闭过滤风．

Answer 1

分析 1、分析图解：图中细菌的分离的方法中，①表示平板划线法，②表示稀释涂布平板法．
2、微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）制备实验所需的培养基时，在各成分都溶化后和分装前，要进行的是调整pH和灭菌，对培养基进行灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌．倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染．
（2）该小组可采用图②所示的稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量．微生物培养过程应该进行无菌操作，配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌，可以将灭菌后的空白平板进行培养以检测培养基灭菌是否彻底．
（3）平板划线法操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线．这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个不连续菌落．
（4）A、平板划线法中，接种环只需要蘸菌液一次，进行连续几次划线操作，A错误；
B、划线分离时，不能把接种环深入到培养基中进行接种，只能在培养基表面进行划线操作，B错误；
C、划线时要将最后一区的划线不能与第一区的划线相连，C错误；
D、在超净平台中进行接种时，不能关闭过滤风，D正确．
故选：D．
故答案为：
（1）调整pH      高压蒸汽灭菌      防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染
（2）稀释涂布平板法  检测培养基平板灭菌是否合格
（3）将聚集的菌体逐步稀释         不连续单个菌落
（4）D

点评 本题主要考查培养基的制作和微生物的接种方法，意在强化学生对实验室的微生物的培养的相关知识的理解与掌握．